解淀粉芽孢杆菌中温α-淀粉酶基因的克隆、表达与酶学性质分析

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以中温α-淀粉酶生产菌株Bacillus amyloliquefaciens M23基因组DNA为模板。PCR扩增得到了2.0kb α-淀粉酶基因全长序列。该基因由上游启动子220bp,结构基因1544bp和终止序列320bp构成。将无信号肽的α-淀粉酶结构基因amyQ,克隆入表达载体pET28a,转化E.coli BL21(DE3),经诱导,测定α-淀粉酶活性。结果表明:α-淀粉酶基因amyQ获得了活性表达,酶活力为2.297U/mL,SDS-PAGE电泳结果显示出分子量约为58kDa特异性蛋白质条带。
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