【摘 要】
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目的建立快捷灵敏的季节性流感病毒PCR-ELISA检测技术。方法根据甲型流感病毒M基因(M)、H1和H3亚型的HA基因(H1-HA、H3-HA)、乙型流感病毒的NS基因(B-NS)保守序列设计引物探针，通过生物素与地高辛的特异性标记，最后通过酶联免疫吸附试验(ELISA)判断PCR扩增的有无。结果M、H1、H3、B-NS四个基因片段所能检测的最低拷贝数分别为：1.43×103、8.67×102、3
【机 构】
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210093 南京大学生命科学学院,210093 南京大学生命科学学院,210009 江苏省疾病预防控制中心,210009 江苏省疾病预防控制中心,210093 南京大学生命科学学院
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目的建立快捷灵敏的季节性流感病毒PCR-ELISA检测技术。
方法根据甲型流感病毒M基因(M)、H1和H3亚型的HA基因(H1-HA、H3-HA)、乙型流感病毒的NS基因(B-NS)保守序列设计引物探针，通过生物素与地高辛的特异性标记，最后通过酶联免疫吸附试验(ELISA)判断PCR扩增的有无。
结果M、H1、H3、B-NS四个基因片段所能检测的最低拷贝数分别为：1.43×103、8.67×102、3.86×103、5.45×103拷贝/μl，其敏感度比普通PCR扩增提高了10倍，且不同流感病毒亚型之间、不同种属病毒之间均不存在交叉反应现象。另外还检测了104份临床标本，本文所建立的PCR-ELISA方法的检测结果与细胞培养完全一致。
结论本文通过特异性和敏感性实验显示此方法灵敏度高，特异性强，且操作简单，可以广泛地应用于流感病毒的实验室检测。
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