【摘 要】
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目的：构建甘精胰岛素（ING）表达载体，提高ING在大肠杆菌中的可溶性表达。方法：在传统方法中ING的A、B链之间用C肽连接，本实验在ING的A、B链之间插入大肠杆菌硫氧还蛋白质（Trx）来替代C
【机 构】
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南京大学医药生物技术国家重点实验室
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划项目(2012AA020304);重大新药创制专项基金资助项目(2012ZX09401012);江苏省科技厅高校科研成果产业化推进工程项目(JH10-1)
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目的：构建甘精胰岛素（ING）表达载体，提高ING在大肠杆菌中的可溶性表达。方法：在传统方法中ING的A、B链之间用C肽连接，本实验在ING的A、B链之间插入大肠杆菌硫氧还蛋白质（Trx）来替代C肽，进行ING的融合表达（ING-Trx），并进一步使用多分子伴侣GroEL、GroES、触发因子进行共表达。结果：可溶性的ING—Trx融合蛋白约占该目的蛋白质总表达量的35％；多分子伴侣共表达后可溶性ING-Trx的产量提高到ING-Trx总蛋白的78％，初步纯化后其产量为4．5mg·L-1，是使用
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