【摘 要】
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为了在烟草中合成咖啡碱,将咖啡碱合成酶（Tea caffeine synthase,TCS）基因cDNA全序列克隆到双元载体pBI121中,通过农杆菌叶盘转化法将TCS基因成功转入烟草,结果得到72株转基因
【机 构】
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西北农林科技大学茶叶研究所,安徽农业大学农业部茶叶生物化学和生物技术重点开放实验室,南京农业大学茶叶科学研究所
【基金项目】
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农业部“948”引进项目（2001-236）,江苏省自然科学基金项目（BK2004101）致谢：本试验是在安徽农业大学农业部茶叶生物化学和生物技术重点开放实验室完成的,试验过程中夏涛教授、方世辉教授、张正竹副教授.胡颍惠老师、李叶云老师等给予了大量帮助,在此一并致以谢意.
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为了在烟草中合成咖啡碱,将咖啡碱合成酶（Tea caffeine synthase,TCS）基因cDNA全序列克隆到双元载体pBI121中,通过农杆菌叶盘转化法将TCS基因成功转入烟草,结果得到72株转基因烟草植株。对其中3株转基因植株进行PCR检测和PCR-Southern检测,证实TCS基因已整合到基因组中;RT-PCR和Northern分析显示,TCS在这些植株中均能正常转录。用从转基因植株中提取的粗酶液进行体外酶促反应,能催化7-甲基黄嘌呤和可可碱向咖啡碱的转变,由此表明,转基因烟草植株中能产生具
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