【摘 要】
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目的观察miRNA在人骨髓白血病干细胞中的表达情况。方法以从人骨髓中分离培养的骨髓白血病干细胞为实验对象,用Mir Va Na试剂盒分离提取细胞内小RNA。用Agilent 2100分析仪分
【机 构】
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中山大学肿瘤防治中心、华南肿瘤学国家重点实验室血液肿瘤科,中山大学肿瘤防治中心、华南肿瘤学国家重点实验室实验研究部
【基金项目】
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广东省科技计划项目(编号:2011B061300070)
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目的观察miRNA在人骨髓白血病干细胞中的表达情况。方法以从人骨髓中分离培养的骨髓白血病干细胞为实验对象,用Mir Va Na试剂盒分离提取细胞内小RNA。用Agilent 2100分析仪分析其完整性和含量。用Agilent人miRNA V12芯片分析miRNA的表达。结果复苏后存活的单核细胞经流式分选出的白血病干细胞群比例为1.58%,细胞数为2.5×105个。分选出的白血病干细胞抽提得到3μg的总RNA。利用安捷伦miRNA芯片一共检测到81个人源miRNA的表达。其中,表达量最高的10个miRNA分别是miR-233、miR-21、miR-142、miR-720、miR-23a、let-7f、let-7a、miR-16、miR-15a和miR-19b。利用Target Scan软件,预测这10个表达量最丰富的miRNA共有2 147个靶标基因。初步进行功能富集分析,发现这些miRNA所调控的基因主要集中在转录调控、生物合成、跨膜运输、免疫系统发育、淋巴系和髓系细胞分化等方面。结论筛选出了在人骨髓白血病干细胞中表达的miRNA,为其参与调控白血病干细胞的增殖分化提供了依据,同时为miRNA在白血病干细胞中潜在应用奠定基础。
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