【摘 要】
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从南极深海底泥中筛选得到一株中度嗜盐菌Halomonas sp．Nj223，利用PCR技术，以该菌株基因组为模板，扩增出ectC基因。将目的基因的PCR扩增产物克隆至表达载体pET-his。经酶切、PCR
【机 构】
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厦门大学生命科学学院,国家海洋局第三海洋研究所海洋生物遗传资源重点实验室
【基金项目】
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大洋专项(DY105-04-02-06)~~
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从南极深海底泥中筛选得到一株中度嗜盐菌Halomonas sp．Nj223，利用PCR技术，以该菌株基因组为模板，扩增出ectC基因。将目的基因的PCR扩增产物克隆至表达载体pET-his。经酶切、PCR鉴定、测序验证结果表明，目的基因插入的位置、大小和读码框均正确，表达载体构建成功。经SDS-PAGE分析，出现预期大小的目的蛋白条带。分离纯化复性的ectoine合成酶后测定其酶活力，在体外验证了ectoine的部分生物合成途径。进一步分析了pH和温度对酶活的影响发现，该酶最适pH为8．0，最适温度为25
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