【摘 要】
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探讨苦参总黄酮(sophoral flavones, SF)改善高糖诱导心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts, CFb)增殖的作用及其相关机制。以25 mmol·L-1D-葡萄糖培养CFb 48 h构建细胞增殖
【机 构】
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吉林医药学院基础医学院; 吉林医药学院临床医学院; 吉林医药学院药学院;
【基金项目】
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吉林省卫生厅资助项目(2012Z060);国家级大学生创新创业训练计划资助项目(201613706021)
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探讨苦参总黄酮(sophoral flavones, SF)改善高糖诱导心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts, CFb)增殖的作用及其相关机制。以25 mmol·L-1D-葡萄糖培养CFb 48 h构建细胞增殖模型,作为模型组; SF (12.5、25和50 mg·L-1)作为干预组。采用MTT法检测细胞活力; ELISA检测转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1, TGF-β1)、基质金属蛋白酶-2 (matrix metalloproteinase-2, MMP-2)、Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ)和Ⅲ型胶原蛋白(collagenⅢ)含量;流式细胞术检测细胞周期变化; Western blot法和免疫荧光法检测抗增殖蛋白(prohibitin, PHB)的表达和定位。动物处置方案经吉林医药学院伦理审查委员会批准。结果表明, 25 mmol·L-1葡萄糖可促进CFb增殖;模型组的TGF-β1、MMP-2、collagenⅠ和collagenⅢ含量高于对照组(P<0.05);高糖条件下处于S期和G2期的细胞数量增加。与对照组相比,模型组的PHB在6 h出现核转位,在48 h蛋白表达下降(P<0.01);与模型组比较, 12.5~50 mg·L-1苦参总黄酮可降低TGF-β1、MMP-2、collagenⅠ和collagenⅢ的含量,增加了G1期细胞数量,在48 h增加了PHB的蛋白表达(P<0.05),但未观察到SF对PHB核转位的影响。以上结果表明, SF可以改善高糖诱导的CFb增殖,其作用与促进PHB表达相关。
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