【摘 要】
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三角酵母 (Trigonopsisvariabilis)的D 氨基酸氧化酶 (D aminoacidoxidase ,DAO ,EC1 .4.3.3)是一种胞内酶 ,完整细胞并不呈现酶促活性。为了获得三角酵母细胞的较高表观活力
【机 构】
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中国科学院上海植物生理研究所!上海200032;
【基金项目】
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国家“九五”科技攻关项目!(96 1 0 2 0 2 0 1 );上海市科学技术发展基金!(98431 91 35)资助&&
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三角酵母 (Trigonopsisvariabilis)的D 氨基酸氧化酶 (D aminoacidoxidase ,DAO ,EC1 .4.3.3)是一种胞内酶 ,完整细胞并不呈现酶促活性。为了获得三角酵母细胞的较高表观活力 ,需对细胞进行处理以改变壁和膜对反应底物和产物的通透性。研究中比较了冻融、丙酮、丁醇和十六烷基三甲基溴化铵 (Cetyltrimethylammoniumbro mide ,CTAB)等理化因子的透性化效率 ,并对丙酮的透性化条件进行了优化。证明丙酮的透性化作用与溶剂浓度、保温时间和温度有关。 30 %~ 35 %丙酮浓度 ,4~ 2 8℃保温 ,可得到最大酶活力。透性化所需时间极短 ,在 5min内即可完成。同时 ,透性化细胞中的DAO比无细胞抽提液中的酶对热更为稳定。用丙酮透性化细胞作为生物催化剂可有效地转化头孢菌素C(CephalosporinC ,CPC)为戊二酰 7ACA(Glutaryl 7 ACA ,GL 7ACA)。
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