siRNA抑制肝癌细胞DNA修复门控基因表达的实验

来源 :肿瘤防治研究 | 被引量 : 0次 | 上传用户:vlon126
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目的本实验旨在研究siRNA抑制DNA修复门控基因Rad52、Ku70和Ku80的效果并筛选出高效的siRNA作用靶位。方法依据siRNA设计原则,针对每一个门控基因的mRNA序列各选择了2个靶位点并构建了相应的siRNA表达载体(psiRNA1~6)。酶切分析及DNA测序鉴定重组质粒构建成功后,将其转染人肝癌细胞株HepG2。RT-PCR和WesternBlot分别用来检测psiRNAs在转录水平和翻译水平干扰靶基因的效果。结果psiRNA1~6作用细胞后明显抑制了靶基因的表达。比较而言,psiRNA1
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