酵母单杂交筛选实验中的关键问题

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目的酵母单杂交系统是研究生物大分子DNA和蛋白质间相互作用的有效手段之一,酵母单杂交筛库实验是获取可以和诱饵序列相互作用的反式作用因子的关键。方法酵母单杂交诱饵质粒pHISi3NF转化YM4271;通过不同浓度3-AT实验,获得酵母单杂交用宿主细胞YM4271pHISi3NF4;大规模筛选人食管癌细胞cDNA文库。结果经筛库后续验证实验证实得到阳性克隆。结论通过准确确定3-AT的工作浓度,有效地完成了酵母单杂交的大规模筛选人食管癌细胞cDNA文库的实验。
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