慢病毒载体法建立乳腺癌GFP—ST3稳定细胞株

来源 :医学研究杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：qiongxiaobao

【摘要】

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目的慢病毒载体法建立乳腺癌GFP—ST3稳定细胞株。方法采用PCR扩增α2，3-ST全长基因片段，克隆至慢病毒载体进行测序分析，将重组慢病毒载体转染人乳腺癌细胞，嘌呤霉素抗性筛选，经荧

【作者】

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崔红霞王明赵学梅邹宇张奇

【机构】

：

齐齐哈尔医学院,黑龙江中医药大学

【出处】

：

医学研究杂志

【发表日期】

：

2015年9期

【关键词】

：

α2 3-ST 绿色荧光蛋白转染表达 α2 3 - ST Green fluorescent protein Transfection Express

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目的慢病毒载体法建立乳腺癌GFP—ST3稳定细胞株。方法采用PCR扩增α2，3-ST全长基因片段，克隆至慢病毒载体进行测序分析，将重组慢病毒载体转染人乳腺癌细胞，嘌呤霉素抗性筛选，经荧光显微镜观察、实时定量PCR、Western blot检测α2，3-ST的表达。结果成功构建了慢病毒载体pGLV5-H1-GFP—ST3，体外转染乳腺癌细胞后，荧光显微镜下可见绿色荧光蛋白的表达，α2，3-STmRNA表达和蛋白水平均明显升高（P〈0．05），获得稳转细胞株。结论成功构建了绿色荧光蛋白为报告基因的α2，3-S

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