噬菌体抗体库技术制备胃癌单抗MGd1的抗独特型抗体

来源 :第三军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：fq1984

【摘要】

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目的获得胃癌单抗MGd1的噬菌体呈现型抗独特型抗体(抗-Id),为研制针对MGd1的抗-Id重组胃癌瘤苗创造条件.方法分离经单抗免疫鼠脾脏的mRNA,经RT-PCR分别扩增抗体VH和VL DNA,进

【作者】

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何凤田李蓉芬郑英如高会广吉清龚薇胡颖

【机构】

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第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室,第三军医大学大坪医院野战外科研究所妇产科

【出处】

：

第三军医大学学报

【发表日期】

：

2005年19期

【关键词】

：

胃癌单克隆抗体抗独特型抗体噬菌体抗体库 gastric carcinoma monoclonal antibody anti-idiotypic

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目的获得胃癌单抗MGd1的噬菌体呈现型抗独特型抗体(抗-Id),为研制针对MGd1的抗-Id重组胃癌瘤苗创造条件.方法分离经单抗免疫鼠脾脏的mRNA,经RT-PCR分别扩增抗体VH和VL DNA,进而连接形成ScFv DNA.将ScFv DNA与载体pCANTAB5E的连接产物转化于大肠杆菌TG1,经M13KO7挽救后获得噬菌体呈现型ScFv文库.以MGd1对文库进行4轮筛选后,随机挑取克隆经ELISA筛选呈现抗-Id ScFv的噬菌体单克隆,进而经竞争ELISA对其所属抗-Id类型进行初步鉴定.结果VH

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