【摘 要】
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目的 建立从肾穿刺活检石蜡组织切片提取DNA并进行PCR扩增的方法.方法 肾脏病理诊断为乙肝病毒相关性肾小球肾炎、原发性IgA肾病和膜性肾病各2例的肾活检组织蜡块,包埋时间1
【机 构】
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大连市中心医院肾内科,解放军总医院肾内科
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目的 建立从肾穿刺活检石蜡组织切片提取DNA并进行PCR扩增的方法.方法 肾脏病理诊断为乙肝病毒相关性肾小球肾炎、原发性IgA肾病和膜性肾病各2例的肾活检组织蜡块,包埋时间1个月～5年.提取方法包括清洁切片、融蜡、消化及DNA的提取.紫外分光光度计测定DNA浓度.应用聚合酶链反应(PCR)扩增血管紧张素转换酶(ACE)和乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)基因片段.结果 2张2 μm厚石蜡切片获取的DNA总量为10～30 μg.ACE基因的PCR扩增结果显示,6例标本均在490 bp和(或)190 bp处显示清晰条带.HBcAg的PCR扩增结果显示,2例乙肝病毒相关性肾小球肾炎标本在132 bp处显示清晰条带,其余4例阴性.结论 本方法可以从肾穿刺活检石蜡切片中获取足够高质量DNA并进行PCR扩增,方法简便,结果稳定,不受包埋时间长短的限制,为肾脏疾病的辅助诊断、肾活检组织的大宗遗传学分析提供了可能.
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