【摘 要】
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目的:对鲜冬虫夏草进行理化鉴别研究。方法:采用聚合酶链式反应法(PCR)、蛋白质电泳法、TLC法、HPLC法。PCR法基于内转录间隔区2(ITS2)序列设计引物进行鉴定;蛋白质电泳法通过超
【机 构】
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广东东阳光药业有限公司国家中医药管理局重点研究室; 深圳市宝安纯中医治疗医院;
【基金项目】
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东莞市院士工作站资助项目(编号:DGYSZ-2018-03);国家重点研发计划(编号:2018YFC1706101)
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目的:对鲜冬虫夏草进行理化鉴别研究。方法:采用聚合酶链式反应法(PCR)、蛋白质电泳法、TLC法、HPLC法。PCR法基于内转录间隔区2(ITS2)序列设计引物进行鉴定;蛋白质电泳法通过超声提取蛋白质,聚丙烯酰胺电泳检测; TLC法采用4%磷酸氢二钠溶液浸渍处理后的硅胶GF254薄层板,以异丙醇-乙酸乙酯-甲醇-水-浓氨试液(5∶3∶1∶1∶0. 1)为展开剂,紫外光灯(254 nm)下检视; HPLC法以Welch,Ultimate AQ-C18(150 mm×4. 6 mm,5μm)为色谱柱;以0. 04 mol·L-1磷酸二氢钾溶液-甲醇为流动相,梯度洗脱;柱温为30℃;流速为1 ml·min-1;检测波长为260 nm。结果:PCR法可鉴别除发酵冬虫夏草菌粉外的7种常见混淆品;蛋白质电泳法可鉴别8种常见混淆品,TLC法可鉴别除蝉花、戴氏虫草外的6种常见混淆品,HPLC法可鉴别除蝉花外的7种常见混淆品。结论:该研究可为鲜冬虫夏草的药材鉴定和质量标准制定提供参考。
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