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评价内毒素攻击大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞时磷酯酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路在线粒体分裂中的作用。
方法将肺泡Ⅱ型上皮细胞以密度2×105/ml接种于6孔板，采用随机数字表法将其分为6组(n＝10)：空白对照组(C组)、LPS组(L组)、LPS＋CORM-2组(L＋CO组)、LPS＋LY294002组(L＋LY组)、LPS＋无活性的CORM-2(iCORM-2)组(L＋iCO组)、LPS＋二甲基亚砜组(L＋D组)。L组、L＋CO组、L＋LY组、L＋iCO组和L＋D组采用10 μg/ml LPS孵育24 h；于LPS孵育前1 h时，L＋CO组、L＋LY组、LPS＋iCO组分别加入CORM-2 100 μmol、LY294002 25 μg、iCORM-2 100 μmol；L＋D组于LPS孵育前1 h加入0.1%二甲基亚砜100 μmol。细胞孵育结束后，采用ELISA法测定培养液TNF-α和IL-6浓度。采用Western bolt法测定细胞磷酸化Akt(p-Akt)、血红素加氧酶-1(HO-1)、线粒体动力相关蛋白1(Drp1)、线粒体分裂相关蛋白1(Fis1)的表达。
结果与C组比较，L组、L＋CO组、L＋LY组、L＋iCO组和L＋D组培养液TNF-α和IL-6浓度升高，p-Akt、HO-1、Drp1和Fis1表达上调(P<0.05)。与L组比较，L＋CO组TNF-α和IL-6浓度降低，p-Akt和HO-1表达上调，Drp1和Fis1表达下调，L＋LY组TNF-α和IL-6浓度升高，p-Akt和HO-1表达下调，Drp1和Fis1表达上调(P<0.05)。
结论内毒素攻击大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞时PI3K/Akt信号通路激活可抑制线粒体分裂。