芥菜新型几丁质酶基因在酵母（Pichia pastoris）中的分泌表达

来源 :农业生物技术学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：fobbvb

【摘要】

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BjCHII基因是从芥菜(Brassicajuncea)中克隆的1个新型几丁质酶基因,编码含2个几丁质结合域的几丁质酶.本研究曾试图在大肠杆菌中表达该基因而未成功,因此试在酵母中表达.按照

【作者】

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欧阳石文赵开军冯兰香谢丙炎

【机构】

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中国农业科学院蔬菜花卉研究所,中国农业科学院作物育种栽培研究所、农业部作物遗传育种重点实验室

【出处】

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农业生物技术学报

【发表日期】

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2002年1期

【关键词】

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酵母基因表达 BjCHI1基因几丁质酶芥菜分泌 Pichia pastorisgene expression BjCHI1chitinase

【基金项目】

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国家自然科学基金

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BjCHII基因是从芥菜(Brassicajuncea)中克隆的1个新型几丁质酶基因,编码含2个几丁质结合域的几丁质酶.本研究曾试图在大肠杆菌中表达该基因而未成功,因此试在酵母中表达.按照BjCHI1 cDNA全序列设计特异引物,通过PCR扩增获得成熟肽第1密码子至最后密码子之间的片段,克隆到载体pPIC9K上,测序验证无误后,转化酵母KM71.获得6个抗1.0 mg/mL遗传霉素(G418)水平的阳性转化子.PCR鉴定表明外源基因已经整合到酵母染色体上.此6个菌株经初步诱导,均表达出预期的蛋白质.对其中

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