鸡降钙素真核表达质粒pCEP4-CT的构建及细胞表达

来源 :上海畜牧兽医通讯 | 被引量 : 0次 | 上传用户:asiware
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构建重组鸡降钙素真核表达载体pCEP4-CT,转染非洲绿猴肾细胞(COS-1)并检测其表达。通过酶切方法自含鸡降钙素(CT)基因的克隆质粒pGEM—T—CT中扩增CT基因,并将其克隆到真核表达载体pCEP4中。阳性克隆鉴定后。在PEI介导下转染非洲绿猴转化肾细胞(COS-1),通过间接免疫荧光试验(IFA)检测CT在COS-1中的表达状况。结果表明,所获重组质粒经过酶切、测序鉴定,证实含有目的片段,且连接、构建正确;在COS-1细胞中检测到了CT的表达,为进一步探讨该基因在动物机体中调控钙代谢奠定了基础。
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