腺病毒携带人乙型肝炎病毒表面前S2抗体基因转染大鼠移植肝预防乙型肝炎病毒再感染

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目的 探讨腺病毒携带人乙型肝炎病毒表面前S2抗体基因预防乙型肝炎病毒(HBV)再感染移植肝的作用.方法将人乙型肝炎病毒表面前S2抗原人源化抗体基因(Ab-H-HBV-S2)克隆入5型腺病毒穿梭质粒载体,在293细胞中重组,产生重组型腺病毒.用重组腺病毒感染冷保存时的大鼠供肝,获得人乙型肝炎病毒表面前S2抗体(简称为:前S2抗体)的表达.观察前S2抗体在体外保护人原代肝细胞不受HBV感染的效果.结果用50%组织培养感染剂量法(TCID50)测定重组腺病毒滴度为5.1×1010 PFU/ml.受鼠肝移植后3d时,血清中前S2抗体的表达量为(16.7±10.5)mg/L,7 d时的表达量为(30.9±13.6)mg/L.当受鼠血清中前S2抗体浓度≥0.5 mg/L时,与HBV和人原代肝细胞共同培养后,检测上清液中乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)为阴性.结论全长Ab-H-HBV-S2基因克隆入腺病毒载体,感染大鼠供肝,获得人源化抗体的表达;表达的前S2抗体能保护人原代肝细胞不受HBV感染。

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