【摘 要】
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各种标签被广泛应用于大肠杆菌分泌表达异源蛋白,其中最简单有效地便是氨基酸标签,尤其是带电荷氨基酸标签。为了研究N端添加不同种类和数目的带电荷氨基酸标签对普鲁兰酶（pul
【机 构】
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江南大学粮食发酵工艺与技术国家工程实验室,江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江南大学糖化学与生物技术教育部重点实验室
【基金项目】
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中央高校基本科研业务费专项资金资助（JUSRP51401A）,863项目（2015AA020802）,973项目（2013CB733602）,国家自然科学基金项目（31570034）
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各种标签被广泛应用于大肠杆菌分泌表达异源蛋白,其中最简单有效地便是氨基酸标签,尤其是带电荷氨基酸标签。为了研究N端添加不同种类和数目的带电荷氨基酸标签对普鲁兰酶（pullulanase,Ba Pul13A）在大肠杆菌中表达分泌水平的影响,构建了25株Ba Pul13A变体。实验结果表明：N端添加9个连续的谷氨酸标签,降低了mRNA的转录水平,增加了N端mRNA的稳定性,使得普鲁兰酶总酶活达到179.60 U/m L,比不添加氨基酸标签的对照菌高278.28%。N端添加7个连续的天冬氨酸标签,增强了大肠杆菌
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