【摘 要】
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[目的]本研究旨在揭示核桃细菌性黑斑病菌(Xanthomonas arboricola pv.juglandis,Xaj) DW3F3中rpfG基因的生物学功能,从而为核桃细菌性黑斑病防治药剂的开发提供作用靶点.[方
【机 构】
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湖北工程学院生命科学技术学院,特色果蔬质量安全控制湖北省重点实验室,湖北孝感432000
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[目的]本研究旨在揭示核桃细菌性黑斑病菌(Xanthomonas arboricola pv.juglandis,Xaj) DW3F3中rpfG基因的生物学功能,从而为核桃细菌性黑斑病防治药剂的开发提供作用靶点.[方法]以野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris pv.campestris,Xcc) 8004菌株以及水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo) PXO99A的rpfG基因为模板序列,对Xaj野生型菌株DW3F3的基因组序列进行检索.利用同源重组技术,对Xaj中rpfG基因进行敲除,并用生物化学方法对基因缺失菌株的相关毒力因子、抗逆性进行检测.[结果]通过同源比对,在XajDW3F3的基因组中发现了与XccrpfG、XoorpfG同源的基因,并成功获得rpfG的缺失突变株△rpfG.与野生型相比,突变株△rpfG的生物被膜形成能力仅为野生型XajDW3F3的44.58％;胞外多糖产量也由野生型的8.47 mg/mL降为5.23 mg/mL;△rpfG的絮凝活性增加,能使菌液变澄清;运动性实验显示△rpfG的运动直径比野生型增加了12.38％;胞外酶的分泌也发生了不同程度的改变,突变株分泌纤维素酶的能力极显著降低,淀粉酶活性有所提高,而分泌蛋白酶的能力未发生变化;此外rpfG缺失后,Xaj对逆境(盐、酸、SDS、硫酸铜)的耐受力降低.[结论]结果表明rpfG基因能影响核桃细菌性黑斑病菌的致病相关性状,并赋予了细菌一定的抗逆性.
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