【摘 要】
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利用聚合酶链反应特异性扩增编码乙型肝炎表面抗原(HBsAg)羧基末端124个氨基酸的基因片段,并将其在大肠杆菌中获得了高效表达。表达产物氨基末端有1个含6组氨酸肽段的20氨基酸融合部分,分子量
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利用聚合酶链反应特异性扩增编码乙型肝炎表面抗原(HBsAg)羧基末端124个氨基酸的基因片段,并将其在大肠杆菌中获得了高效表达。表达产物氨基末端有1个含6组氨酸肽段的20氨基酸融合部分,分子量16178Da,以包含体形式存在,约占细菌总蛋白的22%。以HiTrap亲和层析纯化,纯度可达95%以上。分别用抗HBsAg多克隆抗体和抗HBsAga单克隆抗体进行ELISA检测表明,该蛋白具有HBsAg反应原性。
Polymerase chain reaction (PCR) was used to specifically amplify the 124 amino acids of the carboxyl terminus of hepatitis B surface antigen (HBsAg), which was highly expressed in E.coli. The amino-terminal of the expression product has a 20 amino acid fusion part with 6-histidine peptide, the molecular weight is 16178Da, and exists as inclusion body, accounting for about 22% of the total bacterial protein. Purified by HiTrap affinity chromatography, purity up to 95%. ELISA detection with anti-HBsAg polyclonal antibody and anti-HBsAga monoclonal antibody showed that the protein has HBsAg reactivity.
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