观察Notch3在胰腺导管腺癌细胞(PDAC)中的表达和对PDAC侵袭和转移的调控。
方法采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测Notch3在PDAC中的表达。用小干扰RNA(siRNA)转染高表达PDAC细胞株，通过Western blot法检测各转染组中黏附蛋白CD44v6、钙离子依赖的黏附蛋白(E-cadherin)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、血管内皮生长因子(VEGF)、尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)、环氧化酶(COX-2)、磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK1/2)的表达。采用细胞迁移实验(Transwell小室法)检测细胞的迁移侵袭能力。
结果Transwell细胞迁移实验显示：BXPC-3和PANC-1细胞穿膜细胞数分别为(186.2±3.2)个和(252.5±2.6)个，与对照组HPDE6c7细胞株[(25.6±1.7)个]比较，差异有统计学意义(P＝0.008)。Transwell细胞侵袭实验显示：BXPC-3和PANC-1细胞穿膜细胞数分别为(171.1±2.3)个和(224.7±2.4)个，与对照组HPDE6c7细胞株[(24.4±1.5)个]比较，差异有统计学意义(P＝0.009)，在BXPC-3和PANC-1细胞株中抑制Notch3表达后，Transwell迁移实验显示：BXPC-3和PANC-1穿膜细胞的数量显著高于siRNA转染组的细胞[(230.3±2.2)个比(120.5±1.7)个；(380.4±2.6)个比(165.3±1.8)个，P＝0.032]；Transwell细胞侵袭实验显示：BXPC-3和PANC-1穿膜细胞的数量显著高于siRNA转染组的细胞[(140.6±1.2)个比(45.4±1.5)个；(245.4±1.6)个比(70.3±1.1)个，P＝0.027]。Western blot结果显示，抑制BXPC-3和PANC-1细胞株中Notch3的表达，能够促进E-cadherin蛋白表达，同时抑制CD44v6、MMP-2、MMP-9、VEGF和uPA相关蛋白的表达，并且使COX-2和p-ERK1/2的表达降低。
结论Notch3具有促进人胰腺导管腺癌细胞迁移和侵袭的作用。