牙鲆甲状腺激素受体TRαA介导甲状腺激素调控的靶基因鉴定

来源 :水生生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：hfghtyr56

【摘要】

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为了鉴定牙鲆甲状腺激素受体TRs介导甲状腺激素调控的靶基因,研究采用RT-PCR克隆了TRαA基因的CDS区,并构建了p3×Flag-TRαA重组真核表达载体;该重组质粒转染HEK293T细

【作者】

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谢燕付元帅施志仪季文瑶陶家康

【机构】

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上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室

【出处】

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水生生物学报

【发表日期】

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2020年2期

【关键词】

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牙鲆甲状腺激素甲状腺激素受体TRαA 靶基因 Paralichthys olivaceusThyroid hormoneThyroid hormone re

【基金项目】

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国家自然科学基金(41676138)资助

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为了鉴定牙鲆甲状腺激素受体TRs介导甲状腺激素调控的靶基因,研究采用RT-PCR克隆了TRαA基因的CDS区,并构建了p3×Flag-TRαA重组真核表达载体;该重组质粒转染HEK293T细胞后,RT-PCR、实时定量PCR与Western blot检测均表明牙鲆TRαA在哺乳动物蛋白表达系统中成功转录并翻译;且重组质粒转染的细胞裂解液通过G1亲和层析柱纯化、过滤除菌可得到纯的融合蛋白3×Flag-TRαA,然后双荧光素酶报告实验通过在HEK293T细胞中共转染p3×Flag

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