【摘 要】
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为克隆表达牛肠激酶(enterokinase)轻链(EKL)编码基因,以期应用于融合蛋白的切割与纯化,从市售北方黄牛十二指肠组织中提取总RNA,以R-PCR方法扩增其cDNA片段,将此片段克隆于p
【基金项目】
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国家"九五"重点攻关项目(96 C02 01 04)资助
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为克隆表达牛肠激酶(enterokinase)轻链(EKL)编码基因,以期应用于融合蛋白的切割与纯化,从市售北方黄牛十二指肠组织中提取总RNA,以R-PCR方法扩增其cDNA片段,将此片段克隆于pUCmT载体中,经过特异性限制性内切酶酶切分析片段正确后,进行全序列分析.结果表明,克隆的cDNA与GenBank上的序列相比完全一致,得到了编码正确的牛肠激酶轻链基因全序列.随后,将目的基因片段插入pET39b中,构建了融合型表达载体pET39b-EKL,转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达.所获
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