【摘 要】
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以鸡（Gallus domesticus）成骨细胞总RNA为模板,利用RT-PCR和SOE-PCR技术体外扩增鸡破骨细胞分化因子（RANKL）基因,将PCR产物克隆至组氨酸标签的融合蛋白表达载体pET-32a（＋）,在异丙基-
【基金项目】
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国家自然科学基金（No.30671546）、江苏省自然科学基金（No.BK2004099）和高校博士点基金项目（No.20040307036）
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以鸡（Gallus domesticus）成骨细胞总RNA为模板,利用RT-PCR和SOE-PCR技术体外扩增鸡破骨细胞分化因子（RANKL）基因,将PCR产物克隆至组氨酸标签的融合蛋白表达载体pET-32a（＋）,在异丙基-β-D硫代半乳糖苷（IPTG）诱导下,实现了chRANKL的有效表达,表达产物纯化后稀释成不同浓度梯度作用成熟破骨细胞观察其生物学活性。结果表明,凝胶电泳显示PCR扩增产物的长度为1200bp左右,插入片段与GenBank上报道的鸡RANKL序列完全一致。重组表达载体转化BL21后经
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