东亚钳蝎钙通道样毒素的重组表达及活性研究

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目的:原核表达东亚钳蝎钙通道样毒素,分离纯化并初步探讨其生物学活性。方法:将东亚钳蝎钙通道样毒素BmCa基因重组到PET—GST表达载体中,转化入大肠杆菌BL21并IPTG诱导表达。Ni—Super ChelatingResin柱亲和层析纯化融合蛋白,尿素梯度透析法复性融合蛋白.采用激光共聚焦显微镜观察其对大鼠骨骼肌细胞内钙浓度的影响。结果:成功构建PET—GST—BmCa原核表达质粒.诱导后表达分子量约为33kD的融合蛋白,经亲和层析得较高纯度的融合蛋白,复性后激光共聚焦扫描显微镜检测显示表明重组蛋白能
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