【摘 要】
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目的 观察甲状旁腺激素(PTH)对人肾小管上皮细胞(HK-2)间充质转分化的影响,探讨Wnt信号通路在其中的作用.方法 细胞被分为对照组和PTH处理组.实时定量-聚合酶链反应(RT-PCR)
【机 构】
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250031,济南军区总医院肾内科
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目的 观察甲状旁腺激素(PTH)对人肾小管上皮细胞(HK-2)间充质转分化的影响,探讨Wnt信号通路在其中的作用.方法 细胞被分为对照组和PTH处理组.实时定量-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹法检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及钙黏素E(E-cadherin) mRNA及蛋白的表达;10-10mol/L PTH作用细胞48 h后,采用实时定量PCR芯片技术检测Wnt通路相关基因表达.不同浓度PTH作用后和10-10 mol/L PTH作用不同时间后,用RT-PCR、Western印迹法检测Wnt4 mRNA及蛋白的表达.构建Wnt4过表达及敲除Wnt4的细胞模型,用RT-PCR、Western印迹法检测α-SMA、E-cadherin、Wnt4 mRNA及蛋白质表达.结果 与PTH处理组相比,PTH+DKK1组α-SMA mRNA和蛋白表达量明显降低;E-cadherinmRNA及蛋白表达量明显升高(均P＜0.01).PTH处理组细胞有18个Wnt信号通路基因显著上调和9个基因下调;与对照组相比,PTH处理组细胞Wnt4 mRNA和蛋白表达量明显增加(均P＜0.01);与PTH处理组相比,PTH+Wnt4过表达组α-SMA mRNA和蛋白表达量明显上调,E-cadherin mRNA和蛋白表达量明显下调(均P＜0.05).与PTH处理组相比,PTH+Wnt4 siRNA组α-SMA mRNA和蛋白表达量降低,E-cadherin mRNA和蛋白相对表达量升高(均P＜0.05).结论 甲状旁腺激素诱导HK-2细胞间充质转分化.其机制可能与PTH激活Wnt信号通路,尤其Wnt4信号通路有关.
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