基于GEM展示技术内含肽介导的犬α干扰素快速纯化系统的建立

来源 :中国动物传染病学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：speee

【摘要】

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本研究分别构建含有断裂型内含肽(inteins)C端与犬α干扰素融合基因(C*-CaIFN-α)、断裂型内含肽N端与锚钩蛋白(protein anchor,PA)融合基因(NC1A-PA3)的重组表达质粒,利用IP

【作者】

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仝晴晴杨利乔绪稳陈瑾张元鹏郑其升牛家强侯继波

【机构】

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西藏农牧学院动物科学学院,江苏省农业科学院国家兽用生物制品工程技术研究中心

【出处】

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中国动物传染病学报

【发表日期】

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2019年3期

【关键词】

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断裂型内含肽 GEM C末端剪切纯化 Split intein GEM C-terminal cleavage purification

【基金项目】

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江苏省自主创新项目(CX(15)1064).

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本研究分别构建含有断裂型内含肽(inteins)C端与犬α干扰素融合基因(C*-CaIFN-α)、断裂型内含肽N端与锚钩蛋白(protein anchor,PA)融合基因(NC1A-PA3)的重组表达质粒,利用IPTG诱导表达。通过GEM颗粒(gam-positive baterial enhancermatrixparticles)与PA3之间的特异性结合,将NC1A-PA3蛋白捕获到GEM颗粒上,再利用内含肽的N端与C端的结合,获得GEM-PA3-NC1A-C*-CaIFN-α。在DTT或EDTA存在

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