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目的:用真核转录载体pSilencer2.0构建针对survivin基因的重组真核转录载体,并转染膀胱肿瘤细胞系EJ,通过RNA干扰(RNAi)阻断口细胞中survivin基因的表达。方法:将合成的DNA正义链及反义链变性、退火,形成的双链DNA与pSilencer2.0线性质粒以T4DNA连接酶连接,重组质粒经酶切、DNA测序鉴定后,用脂质体法转染口细胞,通过RT-PCR、免疫印迹检测干扰效果。结果:酶切及测序证实设计合成的DNA已正确插入载体。RT-PCR、免疫印迹检测实验表明:pSilencer2.