【摘 要】
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目的：构建人乳头状瘤病毒（HPV）HPV26和HPV73亚型的单克隆标准品质粒,用于HPV基因芯片制备的质量控制。方法：收集HPV26和HPV73两种亚型感染的临床宫颈刮片脱落细胞样品,提取并PCR
【机 构】
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贵州医科大学基础医学院,贵州医科大学临床医学院,贵州医科大学贵州省分子生物学重点实验室
【基金项目】
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贵州省科技合作计划项目[黔科合LH字（2016）7348], 贵阳市人民政府-贵州医科大学联合基金项目[筑科合同（20161001）002号]
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目的：构建人乳头状瘤病毒（HPV）HPV26和HPV73亚型的单克隆标准品质粒,用于HPV基因芯片制备的质量控制。方法：收集HPV26和HPV73两种亚型感染的临床宫颈刮片脱落细胞样品,提取并PCR扩增样品中HPV的L1区DNA片段,琼脂糖凝胶电泳验证DNA分子量大小;利用基因克隆技术,将L1区DNA片段连接到线性化的p MD18-T质粒载体上,进行琼脂糖凝胶电泳验证质粒连接反应,将构建的HPV质粒转化进入大肠杆菌进行扩增,对质粒进行测序,验证插入DNA序列的正确性;PCR扩增HPV亚型单克隆质粒的L1区
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