【摘 要】
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目的:克隆抗人CD154抗体轻重链可变区基因,并分析其核苷酸序列,为基因工程抗体的构建奠定基础.方法:从分泌能抑制免疫反应的抗人CD154单克隆抗体杂交瘤细胞株7E8中提取总RNA,
【机 构】
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中山大学中山医学院免疫学教研室,中山大学中山医学院生理学教研室,中山大学中山医学院病理生理学教研室
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目的:克隆抗人CD154抗体轻重链可变区基因,并分析其核苷酸序列,为基因工程抗体的构建奠定基础.方法:从分泌能抑制免疫反应的抗人CD154单克隆抗体杂交瘤细胞株7E8中提取总RNA,合成cDNA第一链后,经PCR扩增获得抗人CD154单抗轻链可变区(VL)和重链可变区(VH)基因,分别克隆入pUC18载体,并进行序列分析.结果:①抗体的轻链可变区基因全长为341 bp,编码113个氨基酸,归属于Ig的Vκ2基因,氨基酸序列分析结果显示轻链可变区含有明确的4个骨架区和3个抗原决定簇互补区,在第23位和第93
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