【摘 要】
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为了分离FAdV-3型禽腺病毒,本研究利用鸡肝癌细胞(LMH)从FAdV感染鸡的肝脏中进行病毒分离,利用PCR、测序、TCID50、鸡胚接种等分析方法对分离到的病毒进行鉴定。结果显示,LMH
【机 构】
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天津瑞普生物技术股份有限公司渤海农牧产业联合研究院;
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为了分离FAdV-3型禽腺病毒,本研究利用鸡肝癌细胞(LMH)从FAdV感染鸡的肝脏中进行病毒分离,利用PCR、测序、TCID50、鸡胚接种等分析方法对分离到的病毒进行鉴定。结果显示,LMH细胞接毒96h左右会出现明显的细胞病变,细胞体积变大,形态边圆,折光度增强,贴壁性减弱,呈半悬浮状态。将分离毒株在LMH细胞上连续传代2～3次会稳定出现明显的细胞病变。接种LMH细胞进行TCID50测定,病毒滴度达到10-7.67/0.1ml。将分离株接种鸡胚,96h后死亡,胚体发红萎缩,肝脏出血有坏死灶。用Hexon基因扩增引物对分离株进行PCR扩增,对目的基因测序后进行同源性和基因进化树分析,结果显示与参考毒株SR-49位于同一分支上,同源性在99.4%,同时将分离株命名为SX180203。
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