【摘 要】
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目的 探讨阻塞性黄疸肝损害的调控机制.方法采用胶原酶原位肝灌注法获取大鼠肝细胞,行原代培养,用蛋白激酶(PK)C激动剂帕斯酶埃(PMA)、拮抗剂切勒斯埃作用于肝细胞,再用50 μmol/L甘氨鹅脱氧胆酸钠(GCDC) 作用后行流式细胞术(FCM)及用末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的脱氧核苷酸(dUTP)缺口末端标记技术(TUNEL)检测肝细胞凋亡情况.结扎大鼠胆总管后3、7、14、21 d处死
【机 构】
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430030,武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院普外科,430030,武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院普外科
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目的 探讨阻塞性黄疸肝损害的调控机制.方法采用胶原酶原位肝灌注法获取大鼠肝细胞,行原代培养,用蛋白激酶(PK)C激动剂帕斯酶埃(PMA)、拮抗剂切勒斯埃作用于肝细胞,再用50 μmol/L甘氨鹅脱氧胆酸钠(GCDC) 作用后行流式细胞术(FCM)及用末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的脱氧核苷酸(dUTP)缺口末端标记技术(TUNEL)检测肝细胞凋亡情况.结扎大鼠胆总管后3、7、14、21 d处死大鼠,用TUNEL技术及免疫组织化学方法检测阻塞性黄疸大鼠肝脏组织细胞凋亡状态及PKC蛋白的表达.结果随PMA浓度的增加,肝细胞的凋亡明显增加,随Chelerythrine的增加,肝细胞的凋亡明显减少.大鼠胆总管结扎后随结扎时间的延长细胞凋亡指数(AI)增加,结扎14 d后AI达高峰.PKC表达越强,AI就越高.结论 PKC信号通道参与了阻塞性黄疸肝细胞凋亡的调节,并在阻塞性黄疸肝损害的发生和发展中起重要作用。
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