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利用正交设计和完全随机试验优化蒺藜苜蓿（Medicago truncatula Gaertn）SSR标记的PCR反应体系。结果表明，适合于一年生苜蓿（Medicago L．）遗传分析的SSR技术体系为：10μL反应体系中TaqDNA聚合酶为1U，dNTP浓度为0．20mmol／L，Mg^2＋浓度为2．0mmol／L，引物浓度为1．5umol／L，模板DNA用量为20ng／uL利用该反应体系将2个蒺藜苜蓿亲本和杂交种有效鉴别；利用SSR标记对19个一年生苜蓿种质进行SSR—PCR扩增，用8％的非变性聚丙烯酰