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【摘 要】 作为一种常见的草药，九牛造是蓼科植物的根茎，例如，抱茎蓼、细穗支柱蓼以及支柱蓼等，其中抱茎蓼是其主要生产原。九牛造的根中含有大量的鞣质、大黄酚、大黄酸以及大黄素等，具有非常多的功效，例如收涩固精、理气止痛、散瘀止血等。有关报道称，通过高锰酸钾法测得支柱蓼中含有大量的鞣质，抱茎蓼的根茎中含有大量的榄香精、豆甾醇、大黄素甲醚，而三种蓼科植物的九牛造中都存在大量的没食子酸。
【关键词】 九牛造 总鞣质 提取方法 没食子酸 含量测定
九牛造主要分布在我国的贵州、四川、湖北、湖南以及陕西等地，其根系具有生物致死活性，其所含的氯仿可以有效压制肝癌细胞，苯以及石油醚可以有效毒杀三菱粘虫。其主要化学组分是鞣质类，且以鞣花酸衍生物、没食子酸居多。鞣质具有非常多的功效，例如，抗癌、抗病毒、抗氧化以及抑菌等。本文对九牛造中总鞣质提取方法以及没食子酸含量测定进行研究，主要目的是为了对鞣质资源进行有效开发。
1 实验试剂、仪器以及样品
本次实验的样品为抱茎蓼、细穗支柱蓼以及支柱蓼三种蓼科植物，经过权威鉴定，且采取时间、地点相同。本次实验的主要仪器为微量注射器与薄层扫描仪，该扫描仪选用的型号是CS-930。而试剂主要选用的没食子酸对照品、博层层析硅胶G以及皮粉，试剂的主要来源均为我国权威生产厂家，并都属于分析纯。
2 检测九牛造中总鞣质含量
本次检测所采取的方法为皮粉法。首先，将抱茎蓼、支柱蓼、细穗支柱蓼分别就进行研磨，使其呈粉末状；其次使用3号筛进行筛取，利用小天秤进行称重，确保筛取量为9克；然后，将药材粉末放于锥形瓶中，添加适量的蒸馏水，一般而言，蒸馏水量控制在140毫升为最佳，将锥形瓶放到水浴上进行加热，时间控制在半小时左右即可；最后，加热完成后，将锥形瓶置于常温水中进行冷却，待到锥形瓶温度与室温一致后，将锥形瓶中的溶剂倒入容量在250毫升左右的量瓶内，注满水对其进行稀释，利用过滤网过滤，将过滤所得溶剂作为供试液。
首先，先对九牛造的总水溶性部分进行测量。利用量杯对供试液进行准确测量，确保其容积在23毫升左右，然后将供试液放入坩埚中进行蒸干，对坩埚内的残渣进行干燥处理，将其放置于温度约为100度左右的干燥箱内，三小时后取出，称重。其次，测定与皮粉不相容的水溶性部分。使用量杯选取95毫升左右的供试液，干燥品主要使用皮粉，利用小天秤对其进行精密选取，重量为5克，加入供试液中，然后振摇，约一刻钟后，利用过滤网进性过滤，选取23毫升的过滤溶液放入坩埚中进行蒸干，然后将残渣放置于温度约为100度左右的干燥箱内，三小时后取出，称重。最后，测量皮粉水溶性部分。利用量杯选取容积约为90毫升的蒸馏水，然后按照测定与皮粉不相容的水溶性部分的方式，进行测量，可得最终结果。
对九牛造中的鞣质含量进行计算时，要严格遵照药典公式，通过计算可知，总鞣质在支柱蓼中所占比分为7.413%、在细穗支柱蓼中所占比分为6.347%、在抱茎蓼中所占比分为8.726%。当n=4时，抱茎蓼、细穗支柱蓼以及支柱蓼的RSD分别为1.18%、2.69%、2.06%。
3 检测九牛造中的没食子酸含量
首先，制作对照液以及供试液，留作备用。利用小天秤选取3克左右的抱茎蓼、细穗支柱蓼以及支柱蓼，分别研磨成粗粉状，将其放置于量杯中，注入蒸馏水，蒸馏水量控制在35毫升左右，然后对其进行回流提取，两小时左右后，利用乙酸乙酯对溶液进行萃取，将三种萃取后的溶液进行混合，然后对乙酸乙酯进行回收，待其干燥后，再利用其对萃取液进行定容，选取5毫升放入量瓶中备作供试液。利用小天秤对没食子酸对照品进行称重，确保其重量为3.2毫克，然后遵照供试液的操作方式进行制作，最后选取两毫升定溶液置于量瓶中，备作对照液。
在实验条件方面，遵照相关标准要去选择硅胶G板，确保其CMC-Na含量不低于0.25%，将硅胶G板置于室内进行干燥，然后放入温度在100度左右的干燥箱内进行活化，约半小时后取出，将至放入干燥器中，留做备用。按照1：3：6的比例调配甲酸、乙酸乙酯以及甲苯，作为展开剂，要严格控制上行展开距离，确保其不小于9厘米。在乙醇中填入一定量的三氯化铁，在溶剂显色后，加盖玻板，利用胶布对玻板进行密封固定。通过锯齿扫描可得，线性参数为。
在线性关系方面，选取微量进样器，对没食子酸对照液进行吸取，吸取量分别为9.0、7.0、5.0、3.0、1.0。将这些对照液滴于玻板层上，然后按照相关操作规范要求，展开玻板层，待其显色后，利用扫描仪对斑点峰进行扫描，从而测定其面积的积分值。将积分值作为纵坐标，横坐标为点样量，可得：。由此可知，没食子酸含量范围若控制在10.0～1.0，时，拥有良好的线性关系。
在稳定性方面，利用微量进样器对供试液、对照液进行精密吸取，将吸取液滴于玻板层上，依照线性关系再展开方式进行展开，在其显色后，封面面积将会持续稳定，持续时间约为19小时，在n=4的情况下，供试品的RSD约为2.106%，对照品的RSD约为2.983%。
在样品提取方面，选用两个支柱蓼，要确保二者集号相同，利用蒸馏水对其中一个支柱蓼进行回流提取，回流提取的操作次数是3次为最佳，每次时间应控制在2小时左右，利用超声对另一个支柱蓼进行提取，次数同样为3次，每次时间约为40分钟，最后进行展开，待其显色后，通过扫描可得，采用蒸馏水提取法所得的没食子酸含量约为0.08015%，超声提取法所得含量约为0.01984%，在n=3的情况下，两种样品的RSD分别为4.02%、1.86%。由此可知，蒸馏水回流提取法具有明显优势。
在供试品测定方面，利用微量进样器，吸取9.0供试液、5.0与3.0的对照液，利用交叉法将他们滴于相同玻板层，采用与样品提取一样的方法，进行点样、测定，在计算过程中，选用外标两点法，可得没食子酸在抱茎蓼中所占比约为0.059%、在细穗支柱蓼中所占比约为0.043%、在支柱蓼中所占比约为0.083%，在n=3的情况下，抱茎蓼的RSD约为3.41%，细穗支柱蓼的RSD约为2.58%，支柱蓼的RSD约为3.95%。
结语
本文针对九牛造中总鞣质提取方法和没食子酸含量测定进行了具体研究，可知在鞣质提取方面，利用皮粉法可以有效提高提取率，在没食子酸含量测定方面，蒸馏水回流提取法具有明显优势。
参考文献
[1]郭增军，孙启时，龙丽辉，卜筱茜.九牛造中总鞣质提取方法和没食子酸含量测定研究[J].中药材，2007（11）.
[2]王添敏，孙晓丽，彭雪，翟延君，初正云，张慧，康廷国，陈虎彪.胡桃楸的根、茎枝、叶和果皮中总鞣质的含量测定[J].中国中药杂志，2011（01）.
【关键词】 九牛造 总鞣质 提取方法 没食子酸 含量测定
九牛造主要分布在我国的贵州、四川、湖北、湖南以及陕西等地，其根系具有生物致死活性，其所含的氯仿可以有效压制肝癌细胞，苯以及石油醚可以有效毒杀三菱粘虫。其主要化学组分是鞣质类，且以鞣花酸衍生物、没食子酸居多。鞣质具有非常多的功效，例如，抗癌、抗病毒、抗氧化以及抑菌等。本文对九牛造中总鞣质提取方法以及没食子酸含量测定进行研究，主要目的是为了对鞣质资源进行有效开发。
1 实验试剂、仪器以及样品
本次实验的样品为抱茎蓼、细穗支柱蓼以及支柱蓼三种蓼科植物，经过权威鉴定，且采取时间、地点相同。本次实验的主要仪器为微量注射器与薄层扫描仪，该扫描仪选用的型号是CS-930。而试剂主要选用的没食子酸对照品、博层层析硅胶G以及皮粉，试剂的主要来源均为我国权威生产厂家，并都属于分析纯。
2 检测九牛造中总鞣质含量
本次检测所采取的方法为皮粉法。首先，将抱茎蓼、支柱蓼、细穗支柱蓼分别就进行研磨，使其呈粉末状；其次使用3号筛进行筛取，利用小天秤进行称重，确保筛取量为9克；然后，将药材粉末放于锥形瓶中，添加适量的蒸馏水，一般而言，蒸馏水量控制在140毫升为最佳，将锥形瓶放到水浴上进行加热，时间控制在半小时左右即可；最后，加热完成后，将锥形瓶置于常温水中进行冷却，待到锥形瓶温度与室温一致后，将锥形瓶中的溶剂倒入容量在250毫升左右的量瓶内，注满水对其进行稀释，利用过滤网过滤，将过滤所得溶剂作为供试液。
首先，先对九牛造的总水溶性部分进行测量。利用量杯对供试液进行准确测量，确保其容积在23毫升左右，然后将供试液放入坩埚中进行蒸干，对坩埚内的残渣进行干燥处理，将其放置于温度约为100度左右的干燥箱内，三小时后取出，称重。其次，测定与皮粉不相容的水溶性部分。使用量杯选取95毫升左右的供试液，干燥品主要使用皮粉，利用小天秤对其进行精密选取，重量为5克，加入供试液中，然后振摇，约一刻钟后，利用过滤网进性过滤，选取23毫升的过滤溶液放入坩埚中进行蒸干，然后将残渣放置于温度约为100度左右的干燥箱内，三小时后取出，称重。最后，测量皮粉水溶性部分。利用量杯选取容积约为90毫升的蒸馏水，然后按照测定与皮粉不相容的水溶性部分的方式，进行测量，可得最终结果。
对九牛造中的鞣质含量进行计算时，要严格遵照药典公式，通过计算可知，总鞣质在支柱蓼中所占比分为7.413%、在细穗支柱蓼中所占比分为6.347%、在抱茎蓼中所占比分为8.726%。当n=4时，抱茎蓼、细穗支柱蓼以及支柱蓼的RSD分别为1.18%、2.69%、2.06%。
3 检测九牛造中的没食子酸含量
首先，制作对照液以及供试液，留作备用。利用小天秤选取3克左右的抱茎蓼、细穗支柱蓼以及支柱蓼，分别研磨成粗粉状，将其放置于量杯中，注入蒸馏水，蒸馏水量控制在35毫升左右，然后对其进行回流提取，两小时左右后，利用乙酸乙酯对溶液进行萃取，将三种萃取后的溶液进行混合，然后对乙酸乙酯进行回收，待其干燥后，再利用其对萃取液进行定容，选取5毫升放入量瓶中备作供试液。利用小天秤对没食子酸对照品进行称重，确保其重量为3.2毫克，然后遵照供试液的操作方式进行制作，最后选取两毫升定溶液置于量瓶中，备作对照液。
在实验条件方面，遵照相关标准要去选择硅胶G板，确保其CMC-Na含量不低于0.25%，将硅胶G板置于室内进行干燥，然后放入温度在100度左右的干燥箱内进行活化，约半小时后取出，将至放入干燥器中，留做备用。按照1：3：6的比例调配甲酸、乙酸乙酯以及甲苯，作为展开剂，要严格控制上行展开距离，确保其不小于9厘米。在乙醇中填入一定量的三氯化铁，在溶剂显色后，加盖玻板，利用胶布对玻板进行密封固定。通过锯齿扫描可得，线性参数为。
在线性关系方面，选取微量进样器，对没食子酸对照液进行吸取，吸取量分别为9.0、7.0、5.0、3.0、1.0。将这些对照液滴于玻板层上，然后按照相关操作规范要求，展开玻板层，待其显色后，利用扫描仪对斑点峰进行扫描，从而测定其面积的积分值。将积分值作为纵坐标，横坐标为点样量，可得：。由此可知，没食子酸含量范围若控制在10.0～1.0，时，拥有良好的线性关系。
在稳定性方面，利用微量进样器对供试液、对照液进行精密吸取，将吸取液滴于玻板层上，依照线性关系再展开方式进行展开，在其显色后，封面面积将会持续稳定，持续时间约为19小时，在n=4的情况下，供试品的RSD约为2.106%，对照品的RSD约为2.983%。
在样品提取方面，选用两个支柱蓼，要确保二者集号相同，利用蒸馏水对其中一个支柱蓼进行回流提取，回流提取的操作次数是3次为最佳，每次时间应控制在2小时左右，利用超声对另一个支柱蓼进行提取，次数同样为3次，每次时间约为40分钟，最后进行展开，待其显色后，通过扫描可得，采用蒸馏水提取法所得的没食子酸含量约为0.08015%，超声提取法所得含量约为0.01984%，在n=3的情况下，两种样品的RSD分别为4.02%、1.86%。由此可知，蒸馏水回流提取法具有明显优势。
在供试品测定方面，利用微量进样器，吸取9.0供试液、5.0与3.0的对照液，利用交叉法将他们滴于相同玻板层，采用与样品提取一样的方法，进行点样、测定，在计算过程中，选用外标两点法，可得没食子酸在抱茎蓼中所占比约为0.059%、在细穗支柱蓼中所占比约为0.043%、在支柱蓼中所占比约为0.083%，在n=3的情况下，抱茎蓼的RSD约为3.41%，细穗支柱蓼的RSD约为2.58%，支柱蓼的RSD约为3.95%。
结语
本文针对九牛造中总鞣质提取方法和没食子酸含量测定进行了具体研究，可知在鞣质提取方面，利用皮粉法可以有效提高提取率，在没食子酸含量测定方面，蒸馏水回流提取法具有明显优势。
参考文献
[1]郭增军，孙启时，龙丽辉，卜筱茜.九牛造中总鞣质提取方法和没食子酸含量测定研究[J].中药材，2007（11）.
[2]王添敏，孙晓丽，彭雪，翟延君，初正云，张慧，康廷国，陈虎彪.胡桃楸的根、茎枝、叶和果皮中总鞣质的含量测定[J].中国中药杂志，2011（01）.