【摘 要】
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目的建立1种检测人细小病毒(B19)的荧光定量PCR方法,并应用于纳米膜过滤去除病毒的工艺验证,评价在血液制品生产过程中纳米膜过滤去除B19的效果。方法用上游引物(P1)5’-GGC
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目的建立1种检测人细小病毒(B19)的荧光定量PCR方法,并应用于纳米膜过滤去除病毒的工艺验证,评价在血液制品生产过程中纳米膜过滤去除B19的效果。方法用上游引物(P1)5’-GGC ACC TCT CAA AAC ACT-3’和下游引物(P2)5’-C CAC TCC TTG CTG ATA CTC-3’,在95℃3min、95℃10s52℃10 s72℃10S条件下扩增40个循环,建立检测B19的QPCR方法并验证该方法的专一性、重复性和灵敏性;最后用该方法检测纳米膜过滤去除制品中B19的效果。结果该方法实验内和实验间的精密度均<5%,最低检测限为50 copies/μL;经检测纳米膜过滤可使样品中B19滴度下降3.8Logs。结论成功建立了具有良好专一性、重复性和灵敏性的荧光定量PCR方法。
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