【摘 要】
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目的 研究模拟微重力环境对人角质细胞(HaCaT细胞)创伤修复相关蛋白和基因表达的影响.方法 应用RCCS系统进行模拟微重力细胞培养实验,将HaCaT细胞随机分为模拟微重力(SMG)组
【机 构】
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解放军第306医院普通外科, 北京,100101;解放军第306医院特种医学实验研究中心, 北京,100101;解放军第306医院病理科, 北京,100101
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目的 研究模拟微重力环境对人角质细胞(HaCaT细胞)创伤修复相关蛋白和基因表达的影响.方法 应用RCCS系统进行模拟微重力细胞培养实验,将HaCaT细胞随机分为模拟微重力(SMG)组和正常重力对照(NG)组,培养32、36和42 h后分别收集细胞,检测热休克蛋白70(HSP70)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和Caspase-3的mRNA及蛋白表达水平变化,透射电镜观察2组培养42 h后细胞超微结构变化.结果 SMG组HaCaT细胞培养32、36 h HSP70 mRNA表达量,培养32、36和42 h MMP-9 mRNA及培养36 h Caspase-3 mRNA表达水平均高于NG组(P<0.05).蛋白免疫印迹法检测结果显示,HaCaT细胞经微重力培养32、36和42 h后HSP70和MMP-9蛋白表达趋势与相应蛋白mRNA表达一致,而Caspase-3蛋白表达趋势与相应mRNA表达存在一定差异.透射电镜观察发现,模拟微重力环境下培养42 h后的HaCaT细胞出现皱缩表现,线粒体嵴出现断裂,结构模糊,部分线粒体出现空泡.结论 模拟微重力环境下HaCaT细胞HSP70、MMP-9及Caspase-3表达水平上调,细胞超微结构发生明显病理性改变.
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