猪圆环病毒2型ORF2基因片段的原核表达

来源 :湖南畜牧兽医 | 被引量 : 0次 | 上传用户：richardwang_wjw

【摘要】

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猪圆环病毒2型(PCV2)的衣壳蛋白由ORF2编码.采用PCR技术扩增得到ORF2基因片段,克隆入pUCm-T载体,构建了重组质粒pUCm-PCV2-ORF2.根据pUCm-PCV2-ORF2测序结果设计引物,用Pfu酶

【作者】

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李裕邓舜洲傅胜才黄勇高华刘文峰张文波陈松昌万

【机构】

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湖南省兽药饲料监察所,湖南长沙,410006江西农业大学动物科学技术学院,江西南昌,330045;湖南省畜牧兽医研究所,湖南长沙,410006;沅江市畜牧水产局,湖南沅江,413100;南昌金牧动物保

【出处】

：

湖南畜牧兽医

【发表日期】

：

2016年4期

【关键词】

：

PCV2 ORF2 基因原核表达

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猪圆环病毒2型(PCV2)的衣壳蛋白由ORF2编码.采用PCR技术扩增得到ORF2基因片段,克隆入pUCm-T载体,构建了重组质粒pUCm-PCV2-ORF2.根据pUCm-PCV2-ORF2测序结果设计引物,用Pfu酶扩增替换稀有密码子三联体.改造后的基因片段连接入表达载体pGEX-4T-1,并转化到BL21 (DE3)宿主菌,成功构建了GST-PCV2-ORF2蛋白大肠杆菌工程菌.经诱导表达后,对以包涵体形式存在的GST-PCV2-ORF2重组蛋白进行纯化、复性.复性后的GST-PCV2-ORF2重组蛋白具有良好的反应原性.

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