【摘 要】
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为了探索一种适用于大豆叶片基因组DNA的快速、高效的提取方法,在传统的SDS提取方法的基础上,通过将缓冲液成分和浓度进行改良并加入表面活性剂Tween-20,优化实验流程。用限
【机 构】
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吉林大学植物科学学院,吉林省农业科学院
【基金项目】
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国家科技部“863”计划重点项目“强优势大豆杂交种的创制与应用”(2011AA10A105);国家转基因生物新品种培育科技重大专项“抗病虫转基因大豆新品种培育”(2011ZX08004-004);吉林省青年科研基金项目“大豆细胞质雄性不育恢复基因的精细定位研究”(201201091)
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为了探索一种适用于大豆叶片基因组DNA的快速、高效的提取方法,在传统的SDS提取方法的基础上,通过将缓冲液成分和浓度进行改良并加入表面活性剂Tween-20,优化实验流程。用限制性内切酶对该方法提取的DNA进行酶切及电泳检测,可得均一弥散条带。以提取的DNA模版扩增大豆Actin基因,测序后证实片段正确。同样以其为模版以SSR引物Sctt011进行SSR-PCR反应,并通过聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,也可观察到特异性明显且无杂质的目的条带。实验结果表明,该方法提取的DNA完全符合各种分子实验的要求。本研究方法可用于快速提取大豆叶片基因组DNA,同时提高了提取DNA的质量。
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