阳春砂DXS基因原核表达载体的构建

来源 :广东农业科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：pkuai

【摘要】

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将引入酶切位点的AvDXS的PCR产物及表达载体pRSET-B进行双酶切，连接酶切产物，热击转化至大肠杆菌Ecoli．Top10细胞，通过酶切和测序筛选阳性重组子。研究结果表明，重组子酶切验证获

【作者】

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曾春红黄琼林杨锦芬詹若挺

【机构】

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广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心／中药资源学教育部（省部共建）重点实验室,广州军区总医院附属一五七医院

【出处】

：

广东农业科学

【发表日期】

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2011年22期

【关键词】

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阳春砂 1-去氧-D-木酮糖-5-磷酸合成酶原核表达载体 Amomum villosum Lour. 1-deoxy-D-xylulose-5-phospha

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将引入酶切位点的AvDXS的PCR产物及表达载体pRSET-B进行双酶切，连接酶切产物，热击转化至大肠杆菌Ecoli．Top10细胞，通过酶切和测序筛选阳性重组子。研究结果表明，重组子酶切验证获得了约3000bp和2000bp的产物．与预期大小一致；重组子插入片段序列及其编码的氨基酸序列与模板质粒pGEM—AvDXS-2169完全一致。说明成功构建了构建阳春砂萜类合成途径上游关键酶1-去氧-D-木酮糖-5-磷酸合成酶（1-deoxy—D—xylulose-5-phosphate synthase，DXS）

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