【摘 要】
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[目的]构建具有绿色荧光蛋白报告(GFP)基因的ZNF580真核表达载体,为转染细胞提供基础.[方法]根据ZNF580cDNA序列的开读框架设计上、下游引物,利用PCR技术扩增ZNF580 cDNA开放
【机 构】
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武警医学院细胞生物学与医学遗传学教研室
【基金项目】
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国家重点基础研究发展计划(973计划)，武警医学院校科研和教改项目
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[目的]构建具有绿色荧光蛋白报告(GFP)基因的ZNF580真核表达载体,为转染细胞提供基础.[方法]根据ZNF580cDNA序列的开读框架设计上、下游引物,利用PCR技术扩增ZNF580 cDNA开放阅读框序列,将PCR目的片段与PGEM-T载体连接并克隆,酶切含目的片段PGEM-T质粒及pEGFP-C1载体,回收纯化后做定向克隆连接,BglⅡ及HindⅢ双酶切电泳筛选、鉴定并测序.[结果]酶切pEGFP-C1-ZNF580,电泳分析插入片段长度为:524 bp,与预期的结果一致,经连接点两端进行测序,
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