【摘 要】
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目的 观察内质网蛋白加工通路关键信号分子在镉致胰岛β细胞凋亡过程中的变化规律.方法 以4μmol/L硫酸镉(CdSO4)处理小鼠胰岛素瘤细胞(NIT-1细胞),CCK-8实验检测细胞存活率,Hoechst染色法观察细胞凋亡情况,酶联免疫法测定胰岛素分泌水平;为进一步明确镉致NIT-1细胞凋亡的机制,我们基于课题组前期的KEGG信号通路分析结果,对富集排在首位的信号通路内质网蛋白加工通路的关键信号分子Bax、Bcl-2、Xbp1、Chop、Hsp90aa1进行蛋白免疫印记实验验证.结果 在4 μmol/LC
【机 构】
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大理大学公共卫生学院,云南大理671000
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目的 观察内质网蛋白加工通路关键信号分子在镉致胰岛β细胞凋亡过程中的变化规律.方法 以4μmol/L硫酸镉(CdSO4)处理小鼠胰岛素瘤细胞(NIT-1细胞),CCK-8实验检测细胞存活率,Hoechst染色法观察细胞凋亡情况,酶联免疫法测定胰岛素分泌水平;为进一步明确镉致NIT-1细胞凋亡的机制,我们基于课题组前期的KEGG信号通路分析结果,对富集排在首位的信号通路内质网蛋白加工通路的关键信号分子Bax、Bcl-2、Xbp1、Chop、Hsp90aa1进行蛋白免疫印记实验验证.结果 在4 μmol/LCdSO4处理之后,细胞凋亡率为37.17％(t=-9.24,P＜0.05);细胞分泌的胰岛素浓度为2.84mIU/L,低于对照组(t=-3.68,P＜0.05);蛋白免疫印记实验证实,4 μmol/L CdS04处理后,Bax、Bcl-2、Xbp1、Chop,Hsp90aa1 蛋白相对表达量分别为对照组的 1.82倍(t=-6.14,P＜0.05)、0.6倍(t=9.39,P＜0.05)、0.48倍(t=14.77,P＜0.05)、1.71 倍(t=-5.35,P＜0.05)和 1.77倍(t=-5.70,P＜0.05),差异均具有统计学意义,且变化趋势与基因芯片筛选结果一致.结论 在镉暴露诱导NIT-1细胞发生凋亡过程中,内质网蛋白加工通路的关键信号分子Bax、Bcl-2、Xbp1、Chop、Hsp90aa1 水平发生改变.
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