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目的
观察Toll样受体4(TLR4)在高糖加重缺氧性肾小管上皮细胞损伤中的作用。
方法构建小鼠TLR4-短发夹RNA(TLR4 shRNA)慢病毒载体并包装慢病毒，大鼠肾小管上皮细胞RPTC经低糖(5.5 mmol/L葡萄糖)、高糖(30 mmol/L葡萄糖)、甘露醇(5.5 mmol/L葡萄糖＋24.5 mmol/L甘露醇)培养基处理后，分别使用TLR4 shRNA或空白对照shRNA慢病毒感染RPTC细胞，使用叠氮钠诱导RPTC细胞发生凋亡，采用Western blot法检测TLR4蛋白的表达；细胞核染色检测细胞凋亡变化。
结果TLR4 shRNA慢病毒载体构建并包装成功，高糖组RPTC细胞TLR4蛋白表达水平较低糖组、甘露醇组显著升高(P<0.05)，高糖组RPTC细胞叠氮钠诱导凋亡水平[(65.4±8.1)%]较低糖组[(20.5±9.9)%]、甘露醇组[(18.5±7.3)%]显著升高，差异有统计学意义(P<0.05)。TLR4 shRNA可显著降低高糖组RPTC细胞TLR4蛋白水平，并可使高糖组RPTC细胞凋亡水平由(68.5±9.3)%降至(30.2±7.8)%(P<0.05)。
结论高糖可激活TLR4信号通路，并可显著增加缺氧性肾小管上皮细胞损伤，下调TLR4表达能降低肾小管上皮细胞缺氧性损伤的敏感性，提示高糖加重缺氧性肾小管损伤的作用机制可能是通过TLR4信号通路实现的。