论文部分内容阅读
【摘要】目的：研究筛选栀榆洗剂的提取工艺。方法：以流速、加水量为考察因素，以干膏得率为考察指标，筛选渗漉提取工艺;采取正交试验设计，以煎煮提取次数、提取时长、加水量为考察因素，以干膏得率为考察指标，筛选煎煮提取工艺。结果：栀榆洗剂的最佳提取工艺条件为：大黄以用6倍量水溶解的白矾液以3mL/min/kg流速渗漉;其余地榆等9味浸泡1 d，加7倍量水煎煮提取3次，每次1 h。结论：根据原处方中中药饮片所含成分性质，通过对栀榆洗剂煎煮和渗漉生产工艺几个关键点的研究，确定了栀榆洗剂的生产工艺简便易行，可操作性强，产品得率稳定，质量可控。
【关键词】栀榆洗剂;生产工艺;单因素试验;正交试验
【中图分类号】R284.2【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2021）18-0054-03
Study on Extraction Technology of Zhiyu LotionBAO YunhuiLV SuozhongCAO ChangeDENG YiYANG Fan
Qujing traditional Chinese medicine hospital，Qujing 655000，ChinaAbstract：Objective Study on the extraction process of Zhiyu Lotion and screen out the optimum conditions.Methods The percolation extraction process was screened with the flow rate and water amount as the factors and the dry extract rate as the index;and the orthogonal design was used to screen the extraction process with the extraction times，extraction time and water amount as the factors and the dry extract yield as the index.Ruselt The optimum extraction conditions of Zhiyu lotion were as follows：Alum is dissolved in 6 times the amount of water，Rhubarb was percolated at a flow rate of 3 mL/min/kg with alum solution; the other 9 kinds of Sanguisorba officinalis were soaked for 1 hour，and then extracted by 7 times of water for 3 times，each time for 1 hour.Conclusion According to the properties of the components in the traditional Chinese medicine decoction pieces in the original prescription，through the study of several key points in the decocting and percolation production process of Zhiyu lotion，the production process of Zhiyu lotion is determined to be simple and easy to operate，with strong operability，stable yield and controllable quality.
Keywords：Zhiyu Lotion;Production Technology;Single-factor Test;Orthogonal Test
栀榆洗剂为曲靖市中医医院自主研究纯中药制剂，原处方由本院皮肤科医师张颖组方，其成份由地榆、栀子、大黄、白矾等11味中药组成。具有清热解毒凉血、祛风燥湿止痒之功效，用于湿热壅滞所致的皮肤红肿、丘疹、瘙痒等。基于原处方显著的临床疗效和多年大量积累的用药资料，为方便患者使用，医院特将该处方开发为院内制剂，对其进行了提取工艺的筛选研究。
1仪器与材料
1.1仪器FA1104型0.1mg电子天平（上海上平仪器公司）;AS306000BT型超声波清洗机（天津奥特赛恩斯仪器有限公司）;GZX-9140MBE电热鼓风干燥箱（上海博迅实业有限公司医疗设备厂）。
1.2材料所使用药材由曲靖市中医医院提供，且均符合药典要求。
2方法
根據处方各中药所含化学成分的特性[1-2]，结合临床使用经验，组方中大黄、白矾用渗漉法提取;其余地榆、栀子等9味中药用煎煮法提取。
2.1渗漉工艺筛选影响渗漉工艺的主要因素包括溶媒、溶媒浓度、溶媒量、流速，该实验中溶媒为水，故用单因素实验法重点考察加水量、流速对大黄浸出物的影响。按处方比例称取大黄、白矾中药饮片共120g，大黄粉碎为粗粉，共取6份，分别按照试验要求试验，收集渗漉液，浓缩为稠膏。精密称取各试验项下稠膏10g，分别置于恒重的扁形称量瓶中，于105℃干燥至恒重，精密称定，计算干膏得率。各因素水平见表1。
2.1.1加水量对大黄浸出物的影响按处方比例称取大黄、白矾中药饮片共120g，大黄粉碎为粗粉，以流速为5mL/min·kg考察加水量对大黄浸出物的影响。大黄浸出物随加水量的增加而增加，与5倍量的水相比，加6倍水及7倍水大黄浸出物分别增加4.94%（P<0.01）、7.11%（P<0.01）;与加6倍量的水相比，加7倍水大黄浸出物增加2.49%（P<0.01），其中加6倍水量相比加5倍水量对大黄浸出物的影响较大，结合实际生产及成本，大黄渗漉工艺加水量为6倍水量。结果见表2。 2.1.2流速对大黄浸出物的影响按处方比例称取大黄、白矾中药饮片共120g，大黄粉碎为粗粉，选用6倍量的水作为溶媒来考察流速对大黄浸出物的影响。按处方比例称取大黄、白矾中药饮片共120g，大黄粉碎为粗粉，以流速为5mL/（min·kg）考察加水量对大黄浸出物的影响。大黄浸出物的量与流速成反比，流速为3mL/（min·kg）时，大黄浸出物为44.73%，相比流速为4mL/（min·kg）、5mL/（min·kg）时，浸出物分别增加0.24%（P<0.05）、1.79%（P<0.05），结合实际生产，大黄渗漉工艺流速为3mL/（min·kg）。结果见表3。
2.1.3大黄渗漉工艺验证试验根据加水量及流速对大黄浸出物的影响结果，对其最佳渗漉工艺进行验证，通过3批试验，以大黄浸出物得率作为评价指标，确认提取工艺操作重现性和可行性。大黄、白矾中药饮片共120g，大黄粉碎为粗粉，加6倍水，流速设定为3mL/（min·kg）。结果见表4。
2.1.4验证实验通过验证实验，3组试验RSD为0.3%，证明被验证的渗漉工艺中的加水量及流速处于“控制状态”，表明该渗漉工艺操作具有重现性和可行性。
2.2煮提工艺研究
2.2.1方法按处方比例称取除地榆、栀子的9味中药饮片共120g，共取9份，按正产表中各实验号对应的条件安排试验，收集提取液，浓缩为稠膏。精密称取各试验项下稠膏10g，分别置已恒重的扁形称量瓶中于105℃干燥至恒重，精密稳定，计算干膏得率。
2.2.2水煮提取工艺筛选用L9（34）正交实验[3]对栀榆洗剂的煮提工艺进行筛选，以确定最佳煮提工艺。本试验以地榆、栀子等9味中药的加水量（A）、提取时间（B）、提取次数（C）和误差因素（D）4个因素为考察对象，每个因素设3个水平，以提取物的干膏得率为评价指标，选用L9（34）正交实验设计进行实验，各因素水平见表5。
2.2.3正交试验设计和测定结果按处方比例称取除地榆、栀子等的9味中药饮片共120g，共取9份，根据L9（34）正交实验设计表，将饮片浸泡后按“2.1”项下操作步骤进行试验。结果见表6、表7。
干膏得率方差分析结果表明：因素C（提取次数）对浸膏的提取率有极显著性影响（P<0.01）;因素A（用水量）对浸膏的提取率有显著性影响（P<0.05）、因素B（提取时间）对浸膏的提取率无显著性影响 （P>0.05），三个因素对浸膏提取率的影响顺序为C>A>B，各因素不同水平对浸膏提取率的影响顺序为A3>A2>A1，B3>B2>B1，C3>C2>C1，其最佳提取工艺为A3B1C3。但其中A为次要因素，A2与A3相比出膏率的差值仅为0.58g，结合实际生产及操作成本考虑，综合以上分析，加水量确定为7倍水量，因此确定栀榆洗剂的最佳提取工艺条件为A2B1C3，即每次加7倍量水，提取3次，每次提取时间为1 h。
2.2.4最佳工艺提取工艺验证试验为验证正交实验结果的准确性，以确保提取工艺合理可行，按上述工艺条件A2B1C3重复安排三批试验，结果见表8。三次验证试验结果表明，检测指标数值稳定，说明所有优选的提取条件具有重现性和可行性。
3讨论
栀榆洗剂是我院皮肤科用于治疗银屑病的協定方，目前正处于研发申报阶段。研究[4]表明栀榆洗剂可降低寻常型银屑病进行期患者外周血中的IL-17和IL-23的水平，治疗寻常型银屑疗效确切，能明显改善患者症状，止痒效果好，复发率低，并且无刺激性、未见明显不良反应，疗效安全可靠。
医院制剂研发的协定方，均是经临床多年使用其药效已经得到了证明的处方。制剂研发是把临床处方转向为可大规模生产处方的过程。研发过程中，使协定方和生产处方发挥药效学的化学物质基础尽量保持一致，是需要优先考虑的问题，因此栀榆洗剂采用了中药传统工艺制备方法，用水为溶媒进行提取。在此基础上再根据处方各药味的特点，结合制剂生产实际条件，采取单因素试验法和正交试验法对提取工艺参数进行优化，最终确定了该制剂工艺关键参数。经中试试验证明三批样品均符合《中国药典》（2015版 四部）洗剂项下有关要求，说明本工艺较稳定，具规模化生产可行性。
参考文献
[1]王玉，杨雪，夏鹏飞，等. 大黄化学成分、药理作用研究进展及质量标志物的预测分析[J]. 中草药，2019，50（19）：4821-4837.
[2]韩进庭. 白矾的药理作用及临床应用研究进展[J]. 现代医药卫生，2006（24）：3763-3764.
[3]国家质量监督检验检疫总局质量管理司.质量专业理论与实务（中级）[M].北京：中国人事出版社，2002：261.
[4]符润娥，张颖，罗芳梅，等. 栀榆洗剂治疗寻常型银屑病疗效及对血清IL-17、IL-23水平的影响[J]. 云南中医中药杂志，2019，40（30）：40-42.（收稿日期：2021-02-04编辑：陶希睿）
基金项目：
作者简介：鲍云惠（1978-），女，汉族，本科，主管中药师，研究方向为中药制剂研究与开发。E-mail：[email protected]通信作者：
【关键词】栀榆洗剂;生产工艺;单因素试验;正交试验
【中图分类号】R284.2【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2021）18-0054-03
Study on Extraction Technology of Zhiyu LotionBAO YunhuiLV SuozhongCAO ChangeDENG YiYANG Fan
Qujing traditional Chinese medicine hospital，Qujing 655000，ChinaAbstract：Objective Study on the extraction process of Zhiyu Lotion and screen out the optimum conditions.Methods The percolation extraction process was screened with the flow rate and water amount as the factors and the dry extract rate as the index;and the orthogonal design was used to screen the extraction process with the extraction times，extraction time and water amount as the factors and the dry extract yield as the index.Ruselt The optimum extraction conditions of Zhiyu lotion were as follows：Alum is dissolved in 6 times the amount of water，Rhubarb was percolated at a flow rate of 3 mL/min/kg with alum solution; the other 9 kinds of Sanguisorba officinalis were soaked for 1 hour，and then extracted by 7 times of water for 3 times，each time for 1 hour.Conclusion According to the properties of the components in the traditional Chinese medicine decoction pieces in the original prescription，through the study of several key points in the decocting and percolation production process of Zhiyu lotion，the production process of Zhiyu lotion is determined to be simple and easy to operate，with strong operability，stable yield and controllable quality.
Keywords：Zhiyu Lotion;Production Technology;Single-factor Test;Orthogonal Test
栀榆洗剂为曲靖市中医医院自主研究纯中药制剂，原处方由本院皮肤科医师张颖组方，其成份由地榆、栀子、大黄、白矾等11味中药组成。具有清热解毒凉血、祛风燥湿止痒之功效，用于湿热壅滞所致的皮肤红肿、丘疹、瘙痒等。基于原处方显著的临床疗效和多年大量积累的用药资料，为方便患者使用，医院特将该处方开发为院内制剂，对其进行了提取工艺的筛选研究。
1仪器与材料
1.1仪器FA1104型0.1mg电子天平（上海上平仪器公司）;AS306000BT型超声波清洗机（天津奥特赛恩斯仪器有限公司）;GZX-9140MBE电热鼓风干燥箱（上海博迅实业有限公司医疗设备厂）。
1.2材料所使用药材由曲靖市中医医院提供，且均符合药典要求。
2方法
根據处方各中药所含化学成分的特性[1-2]，结合临床使用经验，组方中大黄、白矾用渗漉法提取;其余地榆、栀子等9味中药用煎煮法提取。
2.1渗漉工艺筛选影响渗漉工艺的主要因素包括溶媒、溶媒浓度、溶媒量、流速，该实验中溶媒为水，故用单因素实验法重点考察加水量、流速对大黄浸出物的影响。按处方比例称取大黄、白矾中药饮片共120g，大黄粉碎为粗粉，共取6份，分别按照试验要求试验，收集渗漉液，浓缩为稠膏。精密称取各试验项下稠膏10g，分别置于恒重的扁形称量瓶中，于105℃干燥至恒重，精密称定，计算干膏得率。各因素水平见表1。
2.1.1加水量对大黄浸出物的影响按处方比例称取大黄、白矾中药饮片共120g，大黄粉碎为粗粉，以流速为5mL/min·kg考察加水量对大黄浸出物的影响。大黄浸出物随加水量的增加而增加，与5倍量的水相比，加6倍水及7倍水大黄浸出物分别增加4.94%（P<0.01）、7.11%（P<0.01）;与加6倍量的水相比，加7倍水大黄浸出物增加2.49%（P<0.01），其中加6倍水量相比加5倍水量对大黄浸出物的影响较大，结合实际生产及成本，大黄渗漉工艺加水量为6倍水量。结果见表2。 2.1.2流速对大黄浸出物的影响按处方比例称取大黄、白矾中药饮片共120g，大黄粉碎为粗粉，选用6倍量的水作为溶媒来考察流速对大黄浸出物的影响。按处方比例称取大黄、白矾中药饮片共120g，大黄粉碎为粗粉，以流速为5mL/（min·kg）考察加水量对大黄浸出物的影响。大黄浸出物的量与流速成反比，流速为3mL/（min·kg）时，大黄浸出物为44.73%，相比流速为4mL/（min·kg）、5mL/（min·kg）时，浸出物分别增加0.24%（P<0.05）、1.79%（P<0.05），结合实际生产，大黄渗漉工艺流速为3mL/（min·kg）。结果见表3。
2.1.3大黄渗漉工艺验证试验根据加水量及流速对大黄浸出物的影响结果，对其最佳渗漉工艺进行验证，通过3批试验，以大黄浸出物得率作为评价指标，确认提取工艺操作重现性和可行性。大黄、白矾中药饮片共120g，大黄粉碎为粗粉，加6倍水，流速设定为3mL/（min·kg）。结果见表4。
2.1.4验证实验通过验证实验，3组试验RSD为0.3%，证明被验证的渗漉工艺中的加水量及流速处于“控制状态”，表明该渗漉工艺操作具有重现性和可行性。
2.2煮提工艺研究
2.2.1方法按处方比例称取除地榆、栀子的9味中药饮片共120g，共取9份，按正产表中各实验号对应的条件安排试验，收集提取液，浓缩为稠膏。精密称取各试验项下稠膏10g，分别置已恒重的扁形称量瓶中于105℃干燥至恒重，精密稳定，计算干膏得率。
2.2.2水煮提取工艺筛选用L9（34）正交实验[3]对栀榆洗剂的煮提工艺进行筛选，以确定最佳煮提工艺。本试验以地榆、栀子等9味中药的加水量（A）、提取时间（B）、提取次数（C）和误差因素（D）4个因素为考察对象，每个因素设3个水平，以提取物的干膏得率为评价指标，选用L9（34）正交实验设计进行实验，各因素水平见表5。
2.2.3正交试验设计和测定结果按处方比例称取除地榆、栀子等的9味中药饮片共120g，共取9份，根据L9（34）正交实验设计表，将饮片浸泡后按“2.1”项下操作步骤进行试验。结果见表6、表7。
干膏得率方差分析结果表明：因素C（提取次数）对浸膏的提取率有极显著性影响（P<0.01）;因素A（用水量）对浸膏的提取率有显著性影响（P<0.05）、因素B（提取时间）对浸膏的提取率无显著性影响 （P>0.05），三个因素对浸膏提取率的影响顺序为C>A>B，各因素不同水平对浸膏提取率的影响顺序为A3>A2>A1，B3>B2>B1，C3>C2>C1，其最佳提取工艺为A3B1C3。但其中A为次要因素，A2与A3相比出膏率的差值仅为0.58g，结合实际生产及操作成本考虑，综合以上分析，加水量确定为7倍水量，因此确定栀榆洗剂的最佳提取工艺条件为A2B1C3，即每次加7倍量水，提取3次，每次提取时间为1 h。
2.2.4最佳工艺提取工艺验证试验为验证正交实验结果的准确性，以确保提取工艺合理可行，按上述工艺条件A2B1C3重复安排三批试验，结果见表8。三次验证试验结果表明，检测指标数值稳定，说明所有优选的提取条件具有重现性和可行性。
3讨论
栀榆洗剂是我院皮肤科用于治疗银屑病的協定方，目前正处于研发申报阶段。研究[4]表明栀榆洗剂可降低寻常型银屑病进行期患者外周血中的IL-17和IL-23的水平，治疗寻常型银屑疗效确切，能明显改善患者症状，止痒效果好，复发率低，并且无刺激性、未见明显不良反应，疗效安全可靠。
医院制剂研发的协定方，均是经临床多年使用其药效已经得到了证明的处方。制剂研发是把临床处方转向为可大规模生产处方的过程。研发过程中，使协定方和生产处方发挥药效学的化学物质基础尽量保持一致，是需要优先考虑的问题，因此栀榆洗剂采用了中药传统工艺制备方法，用水为溶媒进行提取。在此基础上再根据处方各药味的特点，结合制剂生产实际条件，采取单因素试验法和正交试验法对提取工艺参数进行优化，最终确定了该制剂工艺关键参数。经中试试验证明三批样品均符合《中国药典》（2015版 四部）洗剂项下有关要求，说明本工艺较稳定，具规模化生产可行性。
参考文献
[1]王玉，杨雪，夏鹏飞，等. 大黄化学成分、药理作用研究进展及质量标志物的预测分析[J]. 中草药，2019，50（19）：4821-4837.
[2]韩进庭. 白矾的药理作用及临床应用研究进展[J]. 现代医药卫生，2006（24）：3763-3764.
[3]国家质量监督检验检疫总局质量管理司.质量专业理论与实务（中级）[M].北京：中国人事出版社，2002：261.
[4]符润娥，张颖，罗芳梅，等. 栀榆洗剂治疗寻常型银屑病疗效及对血清IL-17、IL-23水平的影响[J]. 云南中医中药杂志，2019，40（30）：40-42.（收稿日期：2021-02-04编辑：陶希睿）
基金项目：
作者简介：鲍云惠（1978-），女，汉族，本科，主管中药师，研究方向为中药制剂研究与开发。E-mail：[email protected]通信作者：