【摘 要】
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目的制备甲状腺转录因子-1(TTF-1)单克隆抗体,为临床工作及后续研究奠定基础。方法以聚合酶链反应扩增目的基因,并构建TTF-1/pET32a重组质粒,诱导表达融合蛋白,经镍琼脂糖亲
【机 构】
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郑州大学第一附属医院病理科,郑州大学基础医学院病理学与病理生理学系,郑州大学第一附属医院内分泌科,河南赛诺特生物技术有限公司
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目的制备甲状腺转录因子-1(TTF-1)单克隆抗体,为临床工作及后续研究奠定基础。方法以聚合酶链反应扩增目的基因,并构建TTF-1/pET32a重组质粒,诱导表达融合蛋白,经镍琼脂糖亲和层析柱洗脱目的蛋白,并将洗脱液经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测蛋白纯度,经过免疫学评价合格后,进行小鼠体内免疫,效价评价后通过细胞融合筛选阳性细胞株,制备分泌TTF-1单克隆抗体,并对得到的抗体进行免疫组化验证。结果获得能稳定分泌TTF-1单克隆抗体的杂交瘤细胞株,且其产生的抗体与TTF-1抗原具有良好的免疫学反应
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