【摘 要】
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目的：探讨秦艽、威灵仙组分配伍对类风湿关节炎（RA）模型大鼠的抗炎效果及作用机制。方法：选取5～6周龄SPF级SD大鼠72只，雌雄各半。除空白组外，均采用Ⅱ型胶原诱导法复制胶原诱导型关节炎大鼠模型（CIA）。将造模成功的64只大鼠按随机数字表法分为模型组、甲氨蝶呤组(0.375 mg·kg-1)、龙胆苦苷配伍木兰花碱组(150.454 1 mg·kg-1+5.061 8 mg·kg-1)、龙胆苦苷
【基金项目】
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国家自然科学基金地区基金项目（81960725）；
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目的：探讨秦艽、威灵仙组分配伍对类风湿关节炎（RA）模型大鼠的抗炎效果及作用机制。方法：选取5～6周龄SPF级SD大鼠72只，雌雄各半。除空白组外，均采用Ⅱ型胶原诱导法复制胶原诱导型关节炎大鼠模型（CIA）。将造模成功的64只大鼠按随机数字表法分为模型组、甲氨蝶呤组(0.375 mg·kg-1)、龙胆苦苷配伍木兰花碱组(150.454 1 mg·kg-1+5.061 8 mg·kg-1)、龙胆苦苷配伍灵仙新苷组(150.454 1 mg·kg-1+16.433 1 mg·kg-1)、獐牙菜苷配伍木兰花碱组(3.455 8 mg·kg-1+5.061 8 mg·kg-1)、獐牙菜苷配伍灵仙新苷组(3.455 8 mg·kg-1+16.433 1 mg·kg-1)、獐牙菜苦苷配伍木兰花碱组(9.303 2 mg·kg-1+5.061 8 mg·kg-1)、獐牙菜苦苷配伍灵仙新苷组(9.303 2 mg·kg-1+16.433 1 mg·kg-1)，每组8只，共9组。各组分别给予相应药液或生理盐水灌胃，连续给药15 d。实验中观察并记录各组大鼠一般状态；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测大鼠血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、类风湿因子（RF）、C反应蛋白（CRP）、前列腺素E2（PGE2）、抗环瓜氨酸肽抗体（anti-CCP Ab）含量；苏木素-伊红（HE）染色法观察各组大鼠踝关节组织病理学变化；免疫组化法（IHC）及蛋白免疫印迹法（Western blot）检测大鼠踝关节核转录因子-κB（NF-κB）、血管内皮生长因子（VEGF）蛋白含量；实时荧光定量聚合酶链式反应法（Real-time PCR）检测大鼠踝关节NF-κB、VEGF的mRNA表达。结果：与空白组比较，模型组大鼠一般状态较差，足跖肿胀显著；血清CRP、anti-CCP Ab、IL-1β含量显著升高（P＜0.01）；踝关节组织结构破坏严重；踝关节NF-κB、VEGF蛋白及mRNA表达显著上调（P＜0.01）。与模型组比较，各给药组大鼠一般状态明显改善；血清TNF-α、IL-1β、RF、CRP、PGE2及anti-CCP Ab的含量均不同程度降低，其中龙胆苦苷配伍灵仙新苷降低TNF-α与IL-1β、龙胆苦苷配伍木兰花碱降低RF与CRP、獐牙菜苦苷配伍木兰花碱降低PGE2、獐牙菜苷配伍灵仙新苷降低anti-CCP Ab的效果优于其他组分配伍；踝关节组织病理变化均有不同程度改善；踝关节NF-κB、VEGF蛋白及mRNA表达明显下调（P＜0.05,P＜0.01），其中獐牙菜苦苷配伍灵仙新苷下调蛋白及mRNA表达作用最为显著。结论：秦艽、威灵仙组分配伍对RA模型大鼠能起到良好的治疗作用，二药组分配伍具有多途径、多靶点协同增效的作用，其中龙胆苦苷配伍木兰花碱、龙胆苦苷配伍灵仙新苷、獐牙菜苷配伍灵仙新苷、獐牙菜苦苷配伍木兰花碱及獐牙菜苦苷配伍灵仙新苷5种组分配伍模式具有潜在优势。其作用机制可能是通过降低炎性因子分泌及抑制NF-κB、VEGF蛋白和mRNA的异常表达而发挥作用。
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