油橄榄HMGR基因家族的克隆表达及功能验证

来源 :基因组学与应用生物学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lucky525
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGR),催化3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A(HMG-Co A)生成甲羟戊酸(MVA),是MVA途径中第一个关键酶。油橄榄是一种重要的经济油料作物,其含有的萜类物质具有重要营养价值,但关于调控萜类物质代谢途径的关键基因研究较少。为研究萜类合成途径关键酶基因HMGR,本研究采用RT-PCR法克隆油橄榄HMGR基因,进行生物信息学分析及构建原核表达载体,对表达蛋白生物活性进行功能验证,并采用荧光定量PCR分析HMGR在油橄榄不同生长阶段的表达量。结果表明:克隆出油橄榄HMGR基因家族的三个基因,分别命名为Oe HMGR1、Oe HMGR2、Oe HMGR3,m RNA ORF的长度分别为1 713 bp、1 773 bp、1 737 bp,编码570、590、578个氨基酸;基因编码蛋白均有2个跨膜区及HMGR催化活性的结构域,不含信号肽;构建了原核表达载体p ET30b(+)-Oe HMGR,转入到大肠杆菌BL21中成功表达,3个重组酶蛋白分子量大小均在66.2~68.0 k D之间,分离纯化重组蛋白进行功能验证,GC-MS检测表明该蛋白具有HMGR催化活性功能;荧光定量PCR分析表明该家族基因在果实和叶片中表达量较高,而在根、茎、花中表达量较低,在开花后45 d、90 d、120 d表达量较低,但在花后165 d表达量上升至较高水平。该研究为进一步鉴定Oe HMGR的功能及油橄榄萜类物质的合成生物学研究奠定基础。
其他文献
把握现在开拓未来———评金彭年著《国际民商事程序法》章尚锦尽管我国的国际私法学已有了长足的发展,但迄今为止,我国学者撰写的国际私法方面的著作也仅有40余种,而关于国际民事
电子档案管理是指借助现代信息技术和网络技术进行档案管理。相对传统的纸质管理,电子档案管理具有强大的信息储存功能,快速的信息转换功能,从而大大提高了工作效率。但是,随
对拐骗儿童后以出卖或勒索为目的进而出卖或勒索钱财的犯罪应如何定罪,刑法分则条文没有明确规定。根据罪数认定理论会出现二种不同的定罪结果。这就造成司法实践中罪数认定
以硝酸铁为氧化剂,尿素为燃料,加入碳球载体,通过溶液燃烧法合成了Fe2O3/C复合材料.考察了引发溶液燃烧温度、燃烧时间对催化剂组成、结构、形貌的影响.结果表明,在不同引发
我院是一所综合性的县级医院,2010年成立导诊台,现有护士2名,1名年轻护士随时提供患者所需(纸杯、热水、轮椅、平车等急需用品),另1名具有工作经验的导诊护士,陪患者到各科室检
道德学习研究的逻辑起点源自西方理性主义与经验主义。道德学习的认知发展观、文化社会观、价值发展观、建构主义观构成道德学习研究的理论基础。道德学习强调道德主体意识的
史灌河(灌河口以上称史河)发源于大别山北麓安徽省金寨县牛山,流经安徽省六安市与河南省固始县,于固始县三河尖汇入淮河。河道全长222km,梅山水库控制面积1970km2,总库容22.64
肉制品在高温熟制过程中,其内源性成分形成许多毒性化合物,其中包括杂环胺,杂环胺具有强大的细菌诱变活性和致癌性,在熟肉制品食用量逐年增加的情况下对人体存在健康风险。本
根据不同的使用性能要求,按给定油缸初始位置的尺度和2个极限位置进行了油缸直推式举升机构的尺寸设计,即初始位置油缸作用力臂最大的机构、上下限位置传动角相等的机构和油
当前,不少大学生对职业的选择存在着一些认知偏差,不能客观公正的实现择业就业,不恰当的择业观使不容乐观的就业形势更加严峻。本文主要从择业意向、择业自我定位、择业态度