【摘 要】
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目的:建立轮状病毒的荧光定量RT-PCR检测方法,用于检测临床腹泻样本。方法:使用Taqman探针技术,建立轮状病毒VP6特异的荧光定量RT-PCR体系。与WHO推荐的轮状病毒检测方法ELIS
【机 构】
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山东大学医学院寄生虫学教研室,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所,山东省病毒学研究所／山东省医学病毒学重点实验室暨卫生部生物技术药物重点实验室,山东省医学科学院基础医学研究所
【基金项目】
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国家“十五”“食物安全关键技术”重大专项课题基金资助(2001BA804A22);国家“十五”科技攻关计划基金资助课题(2003BA712A03-04)
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目的:建立轮状病毒的荧光定量RT-PCR检测方法,用于检测临床腹泻样本。方法:使用Taqman探针技术,建立轮状病毒VP6特异的荧光定量RT-PCR体系。与WHO推荐的轮状病毒检测方法ELISA平行检测,对该体系的检测范围、灵敏度、特异性等参数进行评价。并将该体系用于临床腹泻样本。结果:该荧光定量RT-PCR体系具有高度灵敏度和特异性,线性范围宽,最低可检出1TCID50/ml。对113份临床腹泻样本的平行检测结果显示,该荧光定量RT-PCR体系与ELISA的检出率差异无统计学意义(χ2=0.41,P>0.5),可同样用于临床样本检测。结论:成功建立了轮状病毒荧光定量RT-PCR体系,该体系灵敏、特异、重复性好,可用于临床检测。
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