鱼藤素对淋巴瘤Daudi细胞株细胞增殖细胞凋亡的影响及其机制

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目的 观察鱼藤素对人Burkitt淋巴瘤Daudi细胞株细胞增殖、细胞凋亡和细胞周期的影响,并探讨其分子机制。方法 四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性,Hoechst 33258染色和Annexin-V/PI双标法检测细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞周期分布,Western blot检测细胞内cyclin D1和pRb的蛋白表达。结果鱼藤素对Daudi细胞具有明显的增殖抑制作用,而对正常人外周血单个核细胞(PBMC)抑制作用不明显。鱼藤素可以诱导Daudi细胞凋亡,Hoechst 33258染色可见典型凋亡小体。AnnexinV/PI双标法显示,鱼藤素诱导细胞发生早期凋亡,并呈剂量依赖性,20、40、80nmol/L鱼藤素作用24h时,凋亡率分别为15.46%±0.62%、18.48%±2.98%和31.42%±1.43%。鱼藤素作用Daudi细胞后,主要使细胞周期聚积于G0/G1期,G0/G1期细胞比例随鱼藤素剂量增大而逐渐增高,40nmol/L鱼藤素作用24h达56.56%;相反,S期细胞比例随鱼藤素剂量增大而逐渐降低,对G2/M期细胞作用不明显。鱼藤素使cyclinD1及pRb蛋白表达降低,呈剂量依赖关系。结论 鱼藤素抑制Daudi细胞增殖,使细胞阻滞于G0/G1期,并诱导细胞凋亡。其抗肿瘤机制可能与下调cychn D1和pRb蛋白表达有关。

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