【摘 要】
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目的 观察移植转染胶质源性神经营养因子(GDNF)基因人羊膜细胞(HACs)对创伤性脑损伤(TBI)大鼠海马神经元的影响.方法 采用改进Feeney法制作TBI致海马神经元损伤模型.TBI 24 h
【机 构】
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浙江省嘉兴市第一医院神经外科,苏州大学附属第一医院神经外科,中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所
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目的 观察移植转染胶质源性神经营养因子(GDNF)基因人羊膜细胞(HACs)对创伤性脑损伤(TBI)大鼠海马神经元的影响.方法 采用改进Feeney法制作TBI致海马神经元损伤模型.TBI 24 h后于挫伤灶边缘移植,移植处距硬脑膜4 mm和2 mm深浅两点移植,共5μl含5×10~5个细胞.TBI+GDNF组移植转染GDNF基因HACs;TBI+eGFP组移植转染eGFP基因HACs;TBI+PBS组注射5μl PBS;假TBI组未行移植操作.移植后12 d Morris水迷宫检测结束后制片并行焦油紫染色,检测海马及移植针道靶点周围组织,取移植针道靶点周围组织行RT-PCR检测GDNFmRNA水平.结果 免疫荧光法检测转染GDNF基因HACs荧光显微镜下呈红色荧光.TBI+GDNF组大鼠学习记忆功能明显好于TBI+eGFP组和TBI+PBS组,TBI+eGFP组和TBI+PBS组大鼠损伤侧海马神经元显著缺失,胞体缩小,深染.TBI+GDNF组部分海马神经元缺失.RT-PCR检测TBI+GDNF组GDNFmRNA高水平表达.结论 移植转染GDNF基因HACs对TBI大鼠海马神经元有保护作用.
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